ELSIA操作步驟復(fù)雜,影響反應(yīng)因素較多,HTLV-Ⅰ Elisa試劑盒特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*,因此在定量測(cè)定中,每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的范圍一般較寬,曲線(xiàn)zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙,以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),將各濃度的值逐點(diǎn)連接,所得曲線(xiàn)一般呈S形,其頭、尾部曲線(xiàn)趨于平坦,HTLV-Ⅰ Elisa試劑盒中央較呈直線(xiàn)的部分是的檢測(cè)區(qū)域。
HTLV-Ⅰ Elisa試劑盒技術(shù)操作要點(diǎn):
- 標(biāo)本的采取和保存。
- 試劑的準(zhǔn)備
- 加樣。
- 保溫。
- 洗滌。
- 顯色和比色。
- 酶標(biāo)比色儀。
- 結(jié)果判斷。
將抗原或抗體固定在過(guò)程稱(chēng)為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。HTLV-Ⅰ Elisa試劑盒蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力,其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外,因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí),抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,HTLV-Ⅰ Elisa試劑盒直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被,其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面,其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大提高,因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少,僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如,在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí),需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合??蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線(xiàn)照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時(shí)),以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì),如聚賴(lài)氨酸、*等作預(yù)包被,也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被,HTLV-Ⅰ Elisa試劑盒即用親和素先包被載體,然后加入*化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。
脂類(lèi)物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合,可將其在有機(jī)溶劑(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中,開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干,待酒精揮發(fā)后,讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。
HTLV-Ⅰ Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品*:xyB818Po 豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR1)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 (VEGFR1) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
AEB457Po 豬抗*M1抗體(Anti-GM1)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Anti-Ganglioside M1 Antibody (Anti-GM1) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA518Po 豬鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Ferritin (FE) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyB979Po 豬鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Hepcidin (Hepc) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA804Po 豬胰高血糖素樣肽1(GLP1)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 1 (GLP1) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA816Po 豬α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA710Po 豬*原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Prothrombin Fragment 1+2 (F1+2) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA991Po 豬饑餓素(GHRL)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Ghrelin (GHRL) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyD826Po 豬胰腺型磷脂酶A2(pPLA2)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Phospholipase A2, Pancreas (pPLA2) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA940Po 豬趨化因子C-X-C-基元受體4(CXCR4)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Receptor 4 (CXCR4) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA738Po 豬激活蛋白C(APC)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Activated Protein C (APC) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA480Po 豬肌紅蛋白(MYO)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Myoglobin (MYO) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA547Po 豬血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM1) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA780Po 豬乳鐵傳遞蛋白(LTF)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA485Po 豬氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)ELISA試劑盒 ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyB090Po 豬*S轉(zhuǎn)移酶π1(GSTπ1)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Glutathione S Transferase Pi (GSTp) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA100Po 豬基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA866Po 豬甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Parathyroid Hormone (PTH) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyC918Po 豬成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21(FGF21)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml
xyA899Po 豬骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 ELISA Kit for Osteopontin (OPN) 檢測(cè)范圍 13.275 -1000pg/ml