背景介紹：The Brn family of transcription factors are found in a highly restricted subset of neurons and are critical to the early embryonic development of the central nervous system. Brn-1 and Brn-2 are class III POU (Pit-Oct-Unc) domain proteins, whereas Brn-3 is a class IV POU domain protein. Three Brn-3 proteins have been described and are designated Brn-3a, Brn-3b and Brn-3c. While Brn-3a and Brn-3c stimulate transcription, Brn-3b generally functions as a transcriptional repressor. However, Brn-3b, but not Brn-3a, has been shown to regulate the expression of the acetylcholine receptor. Interestingly, Brn-3a has two functional transactivating domains, one at the amino-terminus and one at the carboxy-terminus. Brn-2 is thought to be involved in smooth muscle cell development and differentiation.
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腦特定蛋白Brn3B抗體,Anti-BRN3B抗體-上海研盟生物有限公司優(yōu)質(zhì)*產(chǎn)品。我公司銷售國內(nèi)外科研產(chǎn)品，如生物試劑、生化試劑，一抗二抗，各種標(biāo)記抗體，Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒，放免試劑盒，培養(yǎng)基，各種動物血清等產(chǎn)品，歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購。
中文名稱：腦特定蛋白Brn3B抗體
英文名稱：Anti-BRN3B antibody
規(guī)格：0.1ml/0.2m
濃度：1mg/1ml
抗體來源：本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型：兔來源為多抗，鼠來源為單抗
產(chǎn)品類型：一抗
腦特定蛋白Brn3B抗體,Anti-BRN3B抗體簡單介紹：
別 名：BRN3B; class 4; transcription factor 2; Brain specific homeobox/POU domain protein 3B; Brain-3B; Brain-specific homeobox/POU domain protein 3B; Brn-3B; BRN3.2; Brn3b POU domain transcription factor; PO4F2_HUMAN; POU class 4 homeobox 2; POU domain; POU domain class 4 transcription factor 2; POU domain protein; POU4F2.
此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售，相關(guān)標(biāo)記有：Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記
石蠟切片免疫組化染色步驟
三步法（以SP試劑盒為例）
- 石蠟切片脫蠟至水
- 蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘，如果采用抗原修復(fù)，可在此步后進行
- 3% H2O2 室溫孵育5~10分鐘，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性，PBS沖洗，2分鐘×3次
- 5~10%正常山羊血清封閉，室溫孵育10分鐘。傾去血清，勿洗，滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗或一抗工作液，37℃孵育1~2小時或4℃過夜
- PBS沖洗，2分鐘×3次
- 滴加適當(dāng)比例稀釋的*標(biāo)記二抗（1%BSA-PBS稀釋），37℃孵育10~30分鐘；或滴加第二代*標(biāo)記二抗工作液，37℃或室溫孵育10~20分鐘
- PBS沖洗，2分鐘×3次
- 滴加適當(dāng)比例稀釋的辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素（PBS稀釋），37℃孵育10~30分鐘；或第二代辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液，37℃或室溫孵育10~20分鐘
- PBS沖洗，2分鐘×3次
- 顯色劑顯色（DAB或AEC）
- 自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水透明、封片
- 如果必要，可選用avdin封閉內(nèi)源性*
腦特定蛋白Brn3B抗體保存條件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復(fù)凍融，保質(zhì)期一年。
免疫組化問題解答
1、染色弱？
原因：抗體濃度過低、孵育時間過短
解決方法：提高抗體濃度、孵育時間不能少于60分鐘
原因：試劑超過有效使用時間
解決方法：應(yīng)更換試劑
原因：操作中添加試劑時緩沖液未瀝干
解決方法：每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液 使試劑稀釋 （應(yīng)防止切片干燥）
原因：室溫太低，低于15度
解決方法：要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4度冰箱過夜
原因：蛋白封閉過度
解決方法：封閉不要超過12分鐘
染色陰性？
原因：操作步驟錯誤
解決方法：應(yīng)重試，設(shè)陽性對照
原因：組織中無抗原
解決方法：設(shè)陽性對照以驗證試驗結(jié)果
原因：一抗與二抗種屬連接錯誤
解決方法：仔細確定一抗二抗種屬無誤
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