超快核酸電泳液干粉
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊 |
超快核酸電泳液干粉 | 20L | 詢價(jià) |
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本產(chǎn)品是聯(lián)邁基因在超快DNA電泳液SuperBuffer的基礎(chǔ)上開發(fā)出的又一新產(chǎn)品。它既可用于DNA的快速電泳（取代傳統(tǒng)的TBE和TAE 電泳緩沖液），又能用于RNA的快速電泳（取代MOPS/甲醛電泳液）。它不但能大大縮短DNA和RNA電泳的時(shí)間，還使DNA膠回收率比TAE和TBE膠高2-3倍。使用本產(chǎn)品，實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備工作更加簡單，再也不需要準(zhǔn)備多種緩沖液。
1. 快速，用以較高電壓電泳DNA和RNA電泳時(shí)，比常規(guī)電泳緩沖液高2-5倍（當(dāng)然，也可以使用跟常規(guī)TBE、TAE和MOPS一樣的電壓進(jìn)行電泳）。一般DNA電泳檢測（如PCR檢測）只需要5-10分鐘即可。
2. 瓊脂糖用量少（一般電泳用0.6-0.8%瓊脂糖即可），節(jié)約成本。
3. DNA膠回收率是TAE和TEB膠回收率的2-3倍，總回收率為80-90%（對(duì)1 kb左右的DNA片段）。
4. 方便，加水即用。既適用于DNA，又適用于RNA，在同一塊凝膠上可以同時(shí)電泳DNA和RNA兩種不同的核酸，再也不需要預(yù)配多種緩沖液。
5. 對(duì)鹽離子的耐受能力比SuperBuffer更強(qiáng)，含鹽反應(yīng)液（如PCR，酶切DNA產(chǎn)物等）也能直接電泳并得到很好的分辨率，不需要脫鹽處理。
6. 由于組成成分不含氨基，故可以使用DEPC處理以去除RNase（Tris 和MOPS由于含氨基，故不能用DEPC直接進(jìn)行RNase滅活處理）。
7. 價(jià)格跟市場上的TAE、TBE和MOPS預(yù)配液相當(dāng)。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相， 離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表：
pNEBRX1-hygro
pNFAT-TA-Luc
pNF-κB-Luc
pNG_v2
pNI_v2
pNN_v2
pNrl-Cre
pNTAP- A
pAP1（PMA）-TA-Luc
pNTAP- B
pNTAP- C
pNTAP-Mef2a
