美國(guó)PolyLC色譜柱這種中性的、極性材料是專門為親水相互作用色譜(HILIC)開發(fā)的。HILIC是在正相色譜基礎(chǔ)上變化的,用極性固定相及其部分水流動(dòng)相來執(zhí)行。一般用來純化分離多肽,核酸、碳水化合物、某些蛋白質(zhì)和極性溶劑。相比于其它材料的HILIC, PolyHYDROXYETHYL A?提供了更加尖銳的峰和更好的選擇性和復(fù)蘇性。他的大極性意味著更少的有機(jī)溶劑需要保留。PolyHYDROXYETHYL A?應(yīng)用于:?
1)分析代謝組學(xué)的極性小分子或者分析通過HILIC-MS / MS的在等離子體或粗提取物中的特異小分子(氨基酸;甲氨喋呤)。
2)涉及到不同極性集團(tuán)的小肽分離和圖譜 (Ser -、糖肽等)。
3)合成的或者天然的肽段或者片段的純化。
4)不溶于水介質(zhì)的溶質(zhì)的高效液相色譜(膜蛋白質(zhì),磷脂)
5)從樣品中去除去污劑,脂肪,鹽
6)寡核糖核酸及其類似物
當(dāng)沒有有機(jī)溶劑的情況下,PolyHYDROXYETHYL A?應(yīng)用于尺寸排阻色譜法(SEC)。
對(duì)于蛋白和多肽,請(qǐng)使用200 -或300-?材料。對(duì)于極性小分子溶質(zhì),請(qǐng)使用我們的3-μm,100-?的材料。
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美國(guó)PolyLC色譜柱
-蛋白質(zhì)的陽離子交換
PolyCAT A?是通過一種*的方法把聚天冬胺酸共價(jià)偶聯(lián)在硅膠上。蛋白質(zhì)從多肽表面洗脫,伴隨有小拖尾的尖銳峰。結(jié)合能力和復(fù)蘇能力也同樣很高。
PolyCAT A?適用于:
1)涉及到脫氨基、PEG化、去唾液酸化等作用的蛋白質(zhì)突變體,廣泛適用于生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)。
2)血紅蛋白變體的臨床化學(xué)實(shí)驗(yàn)室分析。
3)PI大于6的蛋白質(zhì)
4)單克隆抗體
5)組蛋白
由于PolyCAT A?是一種弱陽離子交換(WCX)材料,所以它適用于PH值大于4的條件。無緩沖的醋酸梯度將會(huì)卸載PolyCAT A? ,允許在揮發(fā)性溶劑中洗脫蛋白質(zhì)。
包含了至少兩個(gè)額外的陽離子大于PH4的肽也可以使用PolyCAT A?。更弱的基本肽,如胰多肽片段,不能確定可以被保留。我們建議您使用另一款適用于pH = 2.7 - 3.0的柱子PolySULFOETHYL A?。
大于20 KDa的蛋白質(zhì),我們建議您使用孔隙直徑大于1000-?的產(chǎn)品,可以為您提供選擇性和效率。我們的1000 -?或1500-?孔隙的3-μm材料是可供選擇的用于蛋白質(zhì)分離的陽離子交換材料。
PolySULFOETHYL A
肽的陽離子交換
?強(qiáng)陽離子交換材料(SCX)是專門為肽段的高效液相色譜(HPLC)而設(shè)計(jì)的。在pH值2.7-3.0的時(shí)候,多肽失去(-)離子而獲得(+)離子,因此PolySULFOETHYL A?是一種多用途的替代反相(RPC)的材料,多肽的分離是通過電荷而非極性。對(duì)比其他的基于磺丙基團(tuán)的SCX材料, PolySULFOETHYL A? 有顯著的親水性。將和肽的疏水相互作用降低到小,具有高復(fù)蘇性以及更小的峰拖尾。生產(chǎn)力也很高,允許*消化的弱堿性肽段有更好的保留和分離。離子交換的能力是類似的RPC柱容量的四倍。因而,離子交換應(yīng)該是多步驟純化的第步。
PolySULFOETHYL A?適用于:
混合肽段的高效液相色譜法,如*消化的蛋白質(zhì)組學(xué)分析(包括iTRAQ?和ICAT?*反應(yīng)和產(chǎn)品)。
1)從天然產(chǎn)物分離的肽段。
2)質(zhì)量控制和凈化的合成肽。
3)選擇性的分離*消化的硫化物-肽、磷酸肽以及C端片段。
4)消化的肽段圖譜(*、V8、溴化氫等)
蛋白質(zhì)也可以使用PolySULFOETHYL A? 柱;在PH3的情況小,保證能全部保留下來。一個(gè)例子就是通過親水相互作用模式使用PolySULFOETHYL A?柱分離肺表面蛋白。
多肽分析的標(biāo)準(zhǔn)材質(zhì)是300-?, 3 -或5-μm兩種可供選擇。200-?的材料大約有25%的更大容量,以及更加適用于磷酸肽的分離和iTRAQ?反應(yīng)混合物肽段的分離。對(duì)于蛋白質(zhì),使用1000-?的材料或者3-μm的1500-?的材料。