文齊氏液:文齊氏-液是氰化法(HiCN法)的稀釋劑,當(dāng)血液加入文齊氏-液內(nèi),將血紅蛋白兩價(jià)鐵氧化為三價(jià)鐵,它再與CN化物結(jié)合形成穩(wěn)定棕紅色的氰化高鐵 血紅蛋白,這種溶液在540nm波長的血紅蛋白計(jì)或綠色濾光片的光電比色計(jì)及分光光度計(jì)上,測定人血液中的血紅蛋白濃度。
糖化血紅蛋白自動(dòng)分析儀采用離子交換HPLC法測定HbA1c。離子交換HPLC法,是利用能交換離子的材料為固定相來分離離子型化合物的方法。儀器使用陽離子交換柱進(jìn)行HbA1c的百分比測定;當(dāng)一定量的全血樣品被取樣針吸入到進(jìn)樣裝置內(nèi),在稀釋部分被溶血,釋放出紅細(xì)胞中的血紅蛋白Hb,并由稀釋液稀釋,稀釋好的已經(jīng)溶血的樣品,由高壓泵注入離子交換柱。柱內(nèi)的固定相是最新開發(fā)的非多孔性,不溶和可滲透的交聯(lián)高聚物,上面分布固定的帶電荷基團(tuán)和能游動(dòng)的配衡離子;樣品通過過濾器從交換柱頂端加入后,由三種不同濃度的鹽洗脫緩沖液(流動(dòng)相)洗脫,使樣品向下移動(dòng)。此時(shí)溶液中所含血紅蛋白(Hb)的各種組份即與固定相上能移動(dòng)的離子進(jìn)行交換,樣品中的血紅蛋白多種組分在固定相上連續(xù)進(jìn)行可逆的交換吸著和解吸作用,而3種不同離子濃度的鹽液,形成線性梯度洗脫,洗脫液No1叫起始緩沖液,含低離子濃度的鹽,洗脫液No2、No3緩沖液,其離子濃度依次增高很多,這種流動(dòng)相離子濃度的改變對(duì)分離效果的影響非常明顯,前面洗脫出來的組分分離效果好,色譜峰很窄,后面組分也能在很短時(shí)間內(nèi)洗脫出來,大大縮短了分離時(shí)間;所以全自動(dòng)血紅蛋白分析儀,在1分多鐘內(nèi)、Hb中的多種成份被分離成6個(gè)部分,其中的HbA1c、HbF、HbA1被有效、精確的分離;由交換柱流出的Hb成分到達(dá)儀器的檢測器,檢測器內(nèi)裝有發(fā)射單色光的發(fā)光二極管,通過雙波長可見光比色法測定HbA1c、HbF、HbA1三個(gè)參數(shù)。儀器的檢測器檢測出分離后HbA1c、HbF、HbA1組分的吸光度值,與HbA1c標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值比較,分析計(jì)算出結(jié)果,最后以百分率表示的Hb組分結(jié)果與色譜圖一起打印出來。
文齊氏液