CellSorter可視化細(xì)胞毛細(xì)微吸管系統(tǒng)
該系統(tǒng)是一種安裝在正常倒置顯微鏡上的計(jì)算機(jī)控制的微量吸管系統(tǒng),精準(zhǔn)量化細(xì)胞形變、細(xì)胞間粘附作用和細(xì)胞與基質(zhì)之間的粘附作用,可同步實(shí)現(xiàn)熒光觀測(cè)、單細(xì)胞捕獲、分選和分離和圖像視頻處理
一個(gè)可在已有顯微鏡上搭建的,可同步實(shí)驗(yàn)吸吮加載、圖像視頻處理與熒光觀測(cè)的細(xì)胞力學(xué)裝置。可建立微管吸吮力學(xué)加載-熒光觀測(cè)耦合的分子-細(xì)胞動(dòng)力學(xué)實(shí)時(shí)原位觀測(cè)系統(tǒng)。
單個(gè)細(xì)胞粘附力測(cè)定模式圖:
細(xì)胞與細(xì)胞之間粘附力測(cè)定模式圖:
通過(guò)施加負(fù)壓將細(xì)胞的一部分(或整體)吸入微管中,測(cè)量一定負(fù)壓吸吮作用下細(xì)胞的變形及其時(shí)間歷程或細(xì)胞粘附分離的臨界負(fù)壓來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞的變形特性,同時(shí)記錄細(xì)胞的吸入量。
*圖像處理技術(shù)和力學(xué)模型,精準(zhǔn)量化測(cè)量細(xì)胞形變、細(xì)胞對(duì)之間的相互作用以及黏附特性、基質(zhì)附著細(xì)胞測(cè)定細(xì)胞硬度等力學(xué)特性。
壓電微管吸吮模塊:對(duì)樣品池內(nèi)細(xì)胞的捕獲、分選、吸吮和微操控;
集成倒置熒光相差顯微鏡:用于對(duì)所述細(xì)胞進(jìn)行熒光激發(fā);
信號(hào)采集模塊:用于對(duì)微弱熒光信號(hào)的采集;
控制模塊:用于對(duì)微管吸吮和熒光采集同步觸發(fā),并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理
應(yīng)用范圍:
1)計(jì)算機(jī)控制的自動(dòng)化微吸管系統(tǒng)測(cè)定單細(xì)胞黏附力(Single Cell Adhesion Assay Using Computer Controlled Micropipette)
2)計(jì)算機(jī)控制的自動(dòng)化微吸管系統(tǒng)測(cè)定細(xì)胞與細(xì)胞之間的黏附力(Cell-cell adhesion force assay Using Computer Controlled Micropipette)
匈牙利Cellsorter公司推出的單細(xì)胞獲取及實(shí)施跟蹤分析平臺(tái)為獲取單細(xì)胞提供了完整的解決方案—全自動(dòng) Cellsorter單細(xì)胞高精準(zhǔn)抓取分選系統(tǒng)。 Facsinapetri可從血液、骨髓、制備的組織細(xì)胞懸浮等液態(tài)體系中挑選出感興趣的單細(xì)胞,并可利用利用*的picovitro單細(xì)胞實(shí)時(shí)跟蹤分析培養(yǎng)板進(jìn)行后期的單細(xì)胞實(shí)時(shí)跟蹤分析。 cellsorter單細(xì)胞抓取分選實(shí)時(shí)跟蹤分析系統(tǒng)以顯微鏡為基礎(chǔ),采用計(jì)算機(jī)自動(dòng)控制毛細(xì)管技術(shù)從少量血液、骨髓、制備的各種組織細(xì)胞懸浮液任何單一類型細(xì)胞或稀有細(xì)胞(如循環(huán)腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞以及血液、骨髓中相關(guān)細(xì)胞等)的分離抓取,操作步驟是由軟件控制。
CellSorter可視化細(xì)胞毛細(xì)微吸管系統(tǒng)基本原理:
CellSorter通過(guò)負(fù)壓將細(xì)胞吸入毛
細(xì)管中,測(cè)量負(fù)壓作用下細(xì)胞的
形變及所用時(shí)間或測(cè)量細(xì)胞粘附
分離時(shí)的臨界負(fù)壓來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞的
形變特性,并記錄細(xì)胞的挑取
數(shù)。之后通過(guò)正壓將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到
PCR管中,進(jìn)行其他相關(guān)的細(xì)胞
和分子實(shí)驗(yàn)等。
主要部件:
1. 含閥門控制器或分選頭的CellSorter主機(jī)
2. Zeiss Axio Observer熒光倒置顯微鏡
3. Marzhauser 顯微機(jī)械平移臺(tái)和控制桿
Rita Sala´nki et al, 2014
Péter K. Jania et al, 2016
主要特點(diǎn):
1. 可從培養(yǎng)皿中直接挑取細(xì)胞
2. 分選后的細(xì)胞存活率可以達(dá)到90%以上
3. 每分鐘可分選3-4個(gè)細(xì)胞,每秒可捕獲1個(gè)細(xì)胞
4. 1個(gè)RUN可挑取的細(xì)胞總數(shù)可達(dá)1000個(gè)
5. 可實(shí)現(xiàn)納升級(jí)別的液滴處理精度
6. 硼硅玻璃毛細(xì)管,直徑5-70μm可定制
該系統(tǒng)配備高精度微移液管支架,控制臺(tái)始終保證微量吸液管位于視場(chǎng)的正中心, 并且微移液管控制臺(tái)可非常容易地安裝在物鏡上,同時(shí)軟件可對(duì)移液管的位置進(jìn)行偏差校準(zhǔn)。 微移液管的可通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)控制臺(tái)的旋鈕進(jìn)行手動(dòng)聚焦,且微移液管的科在顯微鏡中非常容易的被觀察到,同時(shí)顯微鏡的圖像可跟進(jìn)調(diào)整; 玻璃微移液管更換非常便捷,當(dāng)更換培養(yǎng)皿時(shí)簡(jiǎn)單地取下來(lái)分選針頭即可。