產(chǎn)品名稱:髓過氧化物酶MPO測試盒
產(chǎn)品規(guī)格:100 管 48 樣
儲(chǔ)存條件:4℃
有效期:6 個(gè)月
測定原理:
中性白細(xì)胞中存在有髓過氧化物酶,每個(gè)細(xì)胞所含的酶的量是一定的,約占細(xì)胞干重的 5%,該酶具有使過氧化氫還原的能力,利用這一特點(diǎn)可以分析酶的活力,并定量測定中 性白細(xì)胞的數(shù)目。其原理如下: MPO+H2O2 復(fù)合物; 復(fù)合物+AH2(供氫體) H2O+MPO+A 產(chǎn)物 通過供氫體鄰連茴香胺供氫后生成黃色化合物,在 460nm 處通過比色測定 A 產(chǎn)物的生 成量,從而推算出 MPO 的活力及 H2O2 減少的量和白細(xì)胞的數(shù)目。
試劑組成與配制:(100 管/48 樣)
試劑一:緩沖貯備液 35mL×1 瓶,按需要量配成緩沖應(yīng)用液,4℃可保存 6 個(gè)月。緩沖 應(yīng)用液的配制:貯備液:雙蒸水=1:9,4℃可保存 1 個(gè)月。
試劑二:粉劑×2 支,4℃可保存 6 個(gè)月。臨用時(shí)每支加緩沖應(yīng)用液 60mL 溶解,可以 37℃加熱溶解, 4℃可保存 2 周。[注]:若您所需測的是組織樣本,并且除髓過氧化物 酶之外,還需測其它項(xiàng)目時(shí),此時(shí)每支試劑二粉劑需配成濃縮一倍的溶液,即每支試劑 二粉劑加到緩沖應(yīng)用液 30mL 中。
試劑三:粉劑×3 支,溶劑 6mL×3 支,4℃可保存 6 個(gè)月。用時(shí) 1 支粉劑倒入 1 支溶 劑中溶解,提前一天配制,充分溶解后 4℃可保存 2 周。
試劑四:溶液 24mL×1 瓶,天冷時(shí)會(huì)凝固,用前放入 37℃以上的水中搖晃使其溶解至 透明后方可應(yīng)用,室溫可保存 6 個(gè)月。
試劑五:粉劑×2 支, 4℃可保存 6 個(gè)月。
試劑六:溶液 0.5mL×1 支,4℃可保存 6 個(gè)月。 顯色劑的配制:臨用時(shí)將試劑五粉劑 1 支加到 100mL 緩沖應(yīng)用液中,充分搖勻,待粉 劑完-全溶解后再加入 試劑六 0.1mL,充分混勻,配好后的顯色劑 4℃避光保存(顏色變深紅后棄用)。
試劑七:溶液 6mL×1 瓶,4℃可保存 6 個(gè)月。
組織樣本的 MPO 測定:
(一)、樣本前處理:準(zhǔn)確稱取組織重量,以配好的試劑二溶液為勻漿介質(zhì),按重量體 積比為 1︰19 加勻漿介質(zhì)制備成 5%的組織勻漿(也可酌情制備成 10%的勻漿),不需要進(jìn)僅供科研實(shí)驗(yàn)使用 行離心。(組織勻漿盡量均勻,不要有大塊組織存在) [注]:若您除做髓過氧化物酶之外,還需測其它指標(biāo)時(shí),則組織勻漿制備要按下面方法: ①、試劑二配制時(shí)要濃縮一倍,即每支試劑二粉劑加到 30mL 緩沖應(yīng)用液中; ②、先用生理鹽水為勻漿介質(zhì)按實(shí)驗(yàn)方法學(xué)制成濃縮一倍的勻漿,即 10%勻漿(腦組織 制備成 20%勻漿),不要離心,取出部分濃縮一倍勻漿按 1︰1 比例加入濃縮一倍的試 劑二溶液,混勻后再進(jìn)行測定。
注意事項(xiàng):
1、天冷時(shí),反應(yīng)液會(huì)出現(xiàn)凝固狀態(tài),吸光度上升,您可以用 25~37℃的水浴箱或取一 個(gè)盛 25~37℃熱水的燒杯放在比色機(jī)旁邊,將各待測管依次放入水浴箱或燒杯中 1~2 分鐘,待凝固消失后即可進(jìn)行比色。
2、混勻時(shí),用旋渦混勻器,使液體上下充分混勻(一定要使最下面液體也能旋轉(zhuǎn) 到上面,建議不要用尖底的管子做,尤其不可用 1.5mL 的 EP 管,因?yàn)檫@樣非常難混勻)
髓過氧化物酶MPO測試盒