商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
種屬來源：人
性別年齡：77歲，亞洲女性
生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞規(guī)格：1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養(yǎng)條件：RPMI-1640 Medium+10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2
凍存條件：90% FBS + 10% DMSO
傳代方法：1:3傳代, 2-3天傳1代
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品：
外生骨疣樣蛋白1(EXTL1)重組蛋白 Recombinant Exostoses Like Protein 1 (EXTL1)
CD200R1 Protein Human 重組人 CD200R1 / CD200R 蛋白
NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
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小鼠合成酶(NOS)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat protein phosphatase (PP) ELISA Kit 大鼠蛋酸酶(PP)檢測試劑盒
Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit 人促有絲分裂因子(MF/MPF)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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飲料精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次
Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
SNU-C5人直腸癌細(xì)胞小鼠組胺檢測試劑盒 小鼠組胺試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠組胺試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠組胺試劑盒、小鼠組胺檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠壞死因子可溶性受體檢測試劑盒 小鼠壞死因子可溶性受體試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠壞死因子可溶性受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠壞死因子可溶性受體試劑盒、小鼠壞死因子可溶性受體檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠癌標(biāo)志物檢測試劑盒 小鼠癌標(biāo)志物試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠癌標(biāo)志物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠癌標(biāo)志物試劑盒、小鼠癌標(biāo)志物檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠絨毛膜檢測試劑盒 小鼠絨毛膜試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠絨毛膜試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠絨毛膜試劑盒、小鼠絨毛膜檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠24S-羥化酶(CYP46)檢測試劑盒 ，英文名： CYP46 ELISA Kit
Porcine insulin (INS) ELISA Kit 豬胰島素(INS)檢測試劑盒
ELISA 小鼠脂聯(lián)素(mouse Adiponectin) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLp-Alpha(MouselipoproteinAlpha)ELISAKit小鼠脂蛋白α
通用型CHIPDNA分子克隆試劑盒10次
ELISAKitPD雞白痢抗體檢測
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
