人LPA檢測Elisa試劑盒,現(xiàn)貨供應(yīng),免費代測。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
上海彩佑生物發(fā)展有限公司 提供各種種屬、各種系列ELISA試劑盒。產(chǎn)品主要用于科研方面,不用于臨床診斷,各種標(biāo)本、種屬、具體指標(biāo)齊全,種屬類有:人、家畜類、水產(chǎn)類、禽類、寵物類、植物類等(如人、大鼠、小鼠、豚鼠、豬、狗、猴、羊、牛、雞、兔),咨詢!
人LPA檢測Elisa試劑盒,本種類齊全:血清血漿、全血、細胞上清液、組織勻漿、體液、尿液、肺泡灌洗液、心房水、胸腹水等等
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本
放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封
袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)
本數(shù)量多,*使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標(biāo)準曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準品孔*孔的
OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(n/5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明為準
利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
(一) 臨床樣本的收集
A、血液樣本
有些生理因素,如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件*為宜,如無法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。
1.外周血
一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細胞計數(shù)、分類等)受生理因素影響波動過大,比較時宜使條件盡量*。涉及到體內(nèi)出、凝血功能的檢測項目(如血小板計數(shù),出血時間或凝血時間等)的檢測,一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項目的檢測必須及時而快速;有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要,尤其涉及血鉀,LDH等的測定。
B、尿液樣本
同血標(biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細胞,上皮細胞,管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運動、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標(biāo)本可增加試驗敏感性,檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數(shù)即Addis計數(shù)(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),因時間較長,細菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛。24小時尿(*天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羥類固醇,兒茶酚胺,Ca2+等,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細菌培養(yǎng),要求無菌,沖洗外陰后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,zui少12 ml,50 ml,定時尿須全部收集,對女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。
C、糞便樣本
糞便標(biāo)本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應(yīng)收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時應(yīng)取粘液、膿血部分,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(化學(xué)法),試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標(biāo)本采集后1小時內(nèi)應(yīng)檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來不及檢測的,應(yīng)及時用PBS進行緩沖處理,離心去上清保存。
D、腦脊液樣本
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,放置過久將影響檢驗結(jié)果:如細胞變性,破壞,導(dǎo)致計數(shù)和分類不準;有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少;細菌發(fā)生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管,*管作細菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難,全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全。
E、胸腹水樣本
與腦脊液標(biāo)本一樣,采集后的標(biāo)本注意安全,及時送檢。一般也分裝三管,一管作常規(guī)細胞學(xué)檢查,一管生化檢查,一管細菌培養(yǎng),順序以與腦脊液相同為宜。
F、前列腺液樣本
前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集,液量少時直接滴在載玻片上及時送檢,須注意防止標(biāo)本蒸干,量多時收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣。
G、精液樣本
精液標(biāo)本采集前應(yīng)禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,保溫并及時送檢。由于精子生成日間變動較大,一般應(yīng)檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷。
H、陰道分泌物樣本
陰道標(biāo)本采集前24小時應(yīng)禁止房事、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標(biāo)本,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本。
,樣本實驗準備
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進行
檢測的樣本,及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5. 培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6. 組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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