豬衣原體抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
【包裝規(guī)格】 96T/盒
【預(yù)期用途】
本試劑盒用于檢測豬血清中豬衣原體抗體，評估豬場豬衣原體疫苗免疫狀況。
【原    理】
本試劑盒系由預(yù)包被豬衣原體蛋白的微孔板和酶標(biāo)記二抗及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬血清或血漿中豬衣原體特異性抗體。實(shí)驗(yàn)時，在包被板中加入對照血清和稀釋的待檢血清，經(jīng)溫育后，若樣品中含有豬衣原體病毒的特異性抗體，則將與包被板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后；再加入酶標(biāo)二抗，與包被板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有特異性抗體。
【豬衣原體抗體檢測試劑盒儲存及有效期】
于2～8℃避光保存，有效期為12個月。
包被板開封后請于2～8℃避光保存，使用期限為1個月。
【試劑盒組成】
1.豬衣原體病毒抗原預(yù)包被微孔板條  96T
2.酶標(biāo)記物  （紅蓋）  11ml×1
3.樣品稀釋液  （黃蓋）  50ml×1
4.20X濃縮洗滌液  （透明蓋） 40ml×1
5.底物液A  （白蓋）  11ml×1
6.底物液B  （黑蓋）  11ml×1 
7.終止液  （黃蓋）  11ml×1
8.陽性對照 （紅蓋，已滅活）  1 ml×1
9.陰性對照 （綠蓋，已滅活）  1 ml×1
10.蓋板膜  1張 
11.自封袋  1個
12.說明書  1份 
【樣品制備】  取動物全血，按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品短期可于2～8℃保存，*需置-20℃保存。
【樣品稀釋】  用樣品稀釋液將待檢血清按1：100倍稀釋（如5μl血清加入495ul樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。
【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（25℃左右），并搖動使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
【試驗(yàn)操作方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量微孔板條，設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰性/陽性對照孔分別加入陰性/陽性對照血清100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的血清樣品100μl。
4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌，同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm（630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A450）。
【結(jié)果判定】
陰性對照呈無色或淺黃色，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗(yàn)有效。
以空白對照調(diào)零，用酶標(biāo)儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度（A值）。待檢孔A值大于陰性對照A值平均值的2.1倍者判為陽性。如陰性對照A值的平均值低于0.08時按0.08計(jì)算。