產(chǎn)品名稱：大鼠抗心肌抗體（AMA）ELISA試劑盒服務專業(yè)
 
英文名稱：Rat Anti-myocardial antibody,AMA ELISA 試劑盒
產(chǎn)品貨號：B-22746
實驗方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）

檢測原理： 采用雙抗體夾心ABC-ELISA原理

（一）　原理

　　ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法（圖a）、用于檢測抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。 　　 

（二）　  大鼠抗心肌抗體（AMA）ELISA試劑盒服務專業(yè)
操作步驟

     方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

　　3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。

　　4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

　　5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測O•D值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O•D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

　　方法二　用于檢測未知抗體的間接法：　　　

　　用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

相關產(chǎn)品： 

人胰高血糖素樣肽1（GLP-1）ELISA試劑盒 Human ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit

人角化細胞生長因子（KGF）ELISA試劑盒 Human Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISA Kit

人巨噬細胞移動抑制因子（MIF）ELISA試劑盒 Human Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit

人白細胞介素23（IL-23）ELISA試劑盒 Human Interleukin 23,IL-23 ELISA Kit

人可溶性P選擇素（sP-selectin）ELISA試劑盒 Human soluble P-selectin,sP-selectin ELISA Kit

人載脂蛋白A1（apo-A1）ELISA試劑盒 Human apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit

人載脂蛋白B100（apo-B100）ELISA試劑盒 Human apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit

人神經(jīng)特異性烯醇化酶（NSE）ELISA試劑盒 Human Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit

人S100B蛋白（S-100B）ELISA試劑盒 Human Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit