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黑豆蚜胞內(nèi)共生菌對(duì)日本柄瘤蚜繭蜂發(fā)育和繁殖的影響

時(shí)間:2013-5-30閱讀:256
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        黑豆蚜胞內(nèi)共生菌對(duì)日本柄瘤蚜繭蜂發(fā)育和繁殖的影響

實(shí)驗(yàn)材料

黑豆蚜用蠶豆苗飼養(yǎng),日本柄瘤蚜繭蜂的日常飼養(yǎng)是在蚜蟲2-3齡時(shí)接蜂,接蜂時(shí)間24小時(shí)。溫度23-25℃,光周期16:8。

實(shí)驗(yàn)步驟
1. 蚜蟲共生菌的脫除

日常飼養(yǎng)的黑豆蚜是有共生細(xì)菌的蚜蟲,稱之為“共生蚜蟲”,其胞內(nèi)共生細(xì)菌的脫除采用飼喂抗生素*的方法。經(jīng)*處理后,脫去共生細(xì)菌的蚜蟲稱為“脫共生蚜蟲”。

2. 蚜繭蜂在共生和脫共生蚜蟲體內(nèi)生長發(fā)育和繁殖的觀察

共生和脫共生黑豆蚜,在發(fā)育到2齡時(shí)分別接入日本柄瘤蚜繭蜂,接蜂時(shí)間為6h。將寄生蜂移去48h后,每隔24h隨機(jī)取出30頭被寄生的蚜蟲進(jìn)行解剖,并測量蚜繭蜂幼蟲的體長,以檢測寄生蜂在共生和脫共生寄主蚜蟲體內(nèi)的生長和發(fā)育情況。待僵蚜形成后,把僵蚜從葉子上剝下后分別存放于玻璃瓶中,每隔12h進(jìn)行抽樣解剖,觀察蚜繭蜂的發(fā)育。當(dāng)寄生蜂羽化時(shí),稱量羽化時(shí)成蜂的體重,并統(tǒng)計(jì)成蜂羽化率。

將剛羽化的蚜繭蜂放入備有足量2齡若蚜的產(chǎn)卵籠內(nèi),同時(shí)供以30%的蜂蜜水,每隔24小時(shí)換一次蚜蟲,直到蚜繭蜂死亡,記錄死亡時(shí)間,計(jì)算蚜繭蜂的壽命。每次換籠48小時(shí)后解剖處理蚜蟲,以寄生蜂的初孵幼蟲數(shù)計(jì)算成蜂的產(chǎn)卵量。

3. 共生和脫共生蚜蟲被寄生后總蛋白和游離氨基酸的測定

蚜繭蜂產(chǎn)卵96h后,被寄生的蚜蟲已有顯著的外部特征,這時(shí),挑取被寄生的蚜蟲,稱重后提取總蛋白,提取使用Wilkinson (2001)的方法。蚜蟲組織中總蛋白含量的測定按Bradford (1976)的方法進(jìn)行。

蚜蟲組織中游離氨基酸的提取見Douglas (1996)的方法;游離氨基酸測定用日立835-50型氨基酸自動(dòng)分析儀。

 

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