人胰高血糖素( GC)試劑盒
免費代測ELISA試劑盒一周內(nèi)出結(jié)果
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北京雅安達生物技術(shù)有限公司立足于北京,面向全國。本產(chǎn)品應(yīng)用于“科研研究和臨床應(yīng)驗”
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主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,生物試劑,免疫組學,生物抗體,蛋白組學,分子生物等。
人胰高血糖素( GC)酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 96T
2pg/ml-80pg/ml
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰高血糖素( GC)含量。實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人胰高血糖素( GC)水平。用純化的人胰高血糖素(GC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰高血糖素(GC),再與 HRP標記的胰高血糖素( GC)抗體結(jié)合,形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。 TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰高血糖素( GC)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度( OD值),通過標準曲線計算樣品中人胰高血糖素( GC)濃度。試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 | 2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品( 160pg/ml) | 0.5ml×1瓶 | 3 | 酶標包被板 | 12孔 × 8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 | 5 | 顯色劑 A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 | 6 | 顯色劑 B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 | |
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于 -20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的( HRP)活性。操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,
然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘。
4.配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此重復 5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻, 37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零, 450nm波長依序測量各孔的吸光度( OD值)。測定應(yīng)在加終止
80pg/ml | 5號標準品 | 150µl的原倍標準品加入 150µl標準品稀釋液 | 40pg/ml | 4號標準品 | 150µl的 5號標準品加入 150µl標準品稀釋液 | 20pg/ml | 3號標準品 | 150µl的 4號標準品加入 150µl標準品稀釋液 | 10pg/ml | 2號標準品 | 150µl的 3號標準品加入 150µl標準品稀釋液 | 5pg/ml | 1號標準品 | 150µl的 2號標準品加入 150µl標準品稀釋液 | |
液后 15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):
計算
以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的 OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)( n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準 .
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。 10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期: 6個月了解更多詳細信息
對外承攬試驗:免疫組化,熒光,Tunel,Elisa,WB,
原位雜交,比色法,HE染色,特染,圖像分析,! (北京雅安達生物技術(shù)有限公司)