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一、人(關(guān)于人的:ELISA試劑盒)的取血法
(1) 足背中靜脈取血:助手固定動物,將其后肢膝關(guān)節(jié)伸直捉到實驗者面前,實驗者將動物腳背面用酒精消毒,找出背中足靜脈后,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾 端,右手拿注射器針刺入靜脈。拔針后立即出血,呈半球狀的隆起。采血后,用紗布或脫脂棉壓迫止血。反復(fù)取血時,兩后肢交替使用。
(2)心臟取血:豚鼠的心臟取血法與兔的采血方法相似。
二、血清和血漿的制備方法
血清和血漿均是不含細(xì)胞(包括血小板)等有形成分的血液液體部分,其主要區(qū)別是血清不含*和血小板,血漿則含有*,它們的制備方法如下:
(1)血清的制備:獲得的血液不能抗凝,盛于離心管或可以離心的器皿中,靜置或置37℃環(huán)境中促其凝固,待血液凝固后,將其平衡后離心(一般為3000rpm,離心 5~10min),得到的上清液即為血清,可小心將上清吸出(注意切勿吸出細(xì)胞成分),分裝備用。
(2)血漿制備:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝劑(抗凝劑:血液 = 1:9,將血液加到一定量后顛倒混勻,離心(離心條件同上)后所得的上清液即為血漿。初用者將上清移至另一清潔容器,吸出血漿時用毛細(xì)吸管貼著液面逐漸往下吸,切忌不能吸起細(xì)胞成分。
(3)富含血小板血漿制備:將獲得的血液經(jīng)800rpm,離心5min,其上清即為富含血小板血漿。
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常用血液抗凝劑
劑名抗凝力機(jī)理應(yīng)用禁忌
10%草酸鉀0.2ml抗凝10ml 的血與Ca2+結(jié)合成不溶性草酸鈣而抗凝血非蛋白氮二氧化碳結(jié)合力血K+
血Ca2+
草酸鈉1~2mg抗凝1ml的血與Ca2+結(jié)合成不溶性草酸鈣而抗凝血*原時間及復(fù)鈣時間測定血K+
Ca2+
3.8%*6mg抗凝1 ml的血與血中生成不溶性離子化的*,阻止血液凝固輸血、凝血象1:9血沉1:4
雙草酸鹽(草酸鉀、草酸胺)0.5ml抗凝5ml的血保持紅細(xì)胞形態(tài)不變RBC壓積測定
草酸鉀3g、氟化鈉1g混合劑4mg抗凝1ml的血抑制葡萄糖分解而保持血糖濃度血糖測定BUN
(尿素氮)
肝素0.1ml抗凝5~10ml的血;15±2.5IU(干粉)抗凝1ml血抑制*原轉(zhuǎn)為*血氨
血氣分析3P試驗
EDTA-K21.5~2.2mg(干粉)抗凝1ml血與Ca2+結(jié)合成不易電離的可溶性絡(luò)合物血細(xì)胞計數(shù)凝血象,血小板功能
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