昆蟲卵巢 降鈣素原(PCT) 鞭毛蛋白(flagellin)
兔主動(dòng)脈平滑肌 反三碘甲狀腺原氨酸(rT3) 多聚血清蛋白(PHSA)
猴腎 6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a) 胞漿免疫球蛋白(CIg)
小鼠血液 戊糖素(Pentosidine) 纖維介素蛋白(fgl2)
小鼠成纖維 變腎上腺素(MN) 泛素蛋白(Ub)
大鼠骨骼肌成肌 多巴胺D1受體(D1R) 類粘蛋白(ORM)
小鼠結(jié)締組織 腎上腺素能a1A受體(ADRA1A) 彈性蛋白(ELN)
小鼠垂體瘤 早老素2(PS-2) 套膜蛋白(iNV)
鼠腦瘤 異丙腎上腺素(iso-Hyd) 肌腱蛋白R(TN-R)
小鼠小膠質(zhì)瘤 胰抑制素(Pancreastatin) 生長相關(guān)蛋白43(GAP-43)
大鼠腦膠質(zhì)瘤 雄激素受體(AR) cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)
小鼠T淋巴瘤(SV40T抗原轉(zhuǎn)染) 松弛肽/松弛素(RLN) 聚集蛋白)
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,
可概括四個(gè)方面:
1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
elisa試劑盒進(jìn)口分裝
進(jìn)口分裝:
檢測范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的*性不是很好。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線zui高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.99。
試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。
檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。
免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
elisa試劑盒樣品收集,處理及保存方法
1、 血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。