天冬氨酸-*特異性蛋白酶家族抗體上海谷研生物科技有限公司產(chǎn)品名其它產(chǎn)品信息:Rabbit anti-human IgG 兔抗人IgG(親和層析純化)1mg
Rabbit anti-horse IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗馬IgG0.1ml
Rabbit anti-human IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗人IgM0.1ml
Rabbit anti-human sIgA 兔抗人分泌型IgA(親和層析純化)1mg
Rabbit anti-mouse IgG-Fc 兔抗小鼠IgG-Fc(親和層析純化)10mg
Rabbit anti-MK IgM 兔抗猴IgM(親和層析純化)1mg
Rabbit anti-mouse IgG1,kappa chain 兔抗小鼠IgG1k鏈(親和層析純化)1mg
Rabbit anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM(親和層析純化)1mg
Rabbit anti-Mink IgG 兔抗水貂IgG(親和層析純化)0.1ml
天冬氨酸-*特異性蛋白酶家族抗體 Rabbit FITC 兔抗熒光素(FITC)2mg
Goat anti-Human HSA 羊抗人白蛋白(HSA)2mg
Bovine IgM (親和純化) 牛IgM1mg
Chicken IgM (親和純化) 雞IgM10mg
Goat IgM (親和純化) 羊IgM1mg
Horse IgM (親和純化) 馬IgM1mg
human IgM (免疫親和純化)人IgM1mg
human sIgA (親和純化) 人分泌型IgA10mg
Monkey IgG (親和純化) 猴IgG50mg
Rabbit anti-Mink IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)兔抗水貂抗體IgG0.1ml
Donkey anti-Goat IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記驢抗羊IgG0.1ml
human-HSA/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記人血清白蛋白1ml
Rabbit anti-rat Ig/HRP 辣根過氧化物酶 標(biāo)記的兔抗大鼠Ig0.2ml
Goat anti-Rabbit Ig/HRP 辣根過氧化物酶 標(biāo)記的羊抗兔Ig0.2ml
human GAPDH polyclonal antibody /HRP 辣根過氧化物酶 標(biāo)記的抗人GAPDH多抗0.5ml
Goat anti-Rabbit IgG/AP 堿性磷酸酶標(biāo)記羊抗兔IgG0.1ml
Biotin/AP 堿性磷酸酶標(biāo)記*0.1ml
Goat anti-mouse IgM/AP 堿性磷酸酶標(biāo)記羊抗小鼠IgM0.1ml
Rabbit anti-MK IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗猴IgG0.3ml
Rabbit anti-Dog IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗狗IgG0.3ml
Rabbit anti-guinea pig IgM/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗豚鼠IgM0.3ml單克隆抗體(單抗)問世以來,在生物醫(yī)學(xué)研究及某些疾病的診斷及治療中發(fā)揮了重大作用,被譽為免疫學(xué)領(lǐng)域的一次革命?,F(xiàn)已廣泛的應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和應(yīng)用中。理論上,只要有抗原就可以制備成抗體,因此,單抗已應(yīng)用于生物學(xué)(包括農(nóng)業(yè))、醫(yī)學(xué)、工業(yè)制藥、化工及工業(yè)發(fā)酵等領(lǐng)域。作為檢驗醫(yī)學(xué)實驗室的診斷試 劑,單克隆抗體以其特異性強、純度高、均一性好等優(yōu)點,廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗、放射免疫分析、免疫組化和流式細(xì)胞儀等技術(shù)。并且單克隆抗體的應(yīng)用, 很大程度上促進(jìn)了商品化試劑盒的發(fā)展。
免疫動物 免疫動物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性Balb/c小鼠,按照預(yù)先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射。 抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫器官,刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細(xì)胞。
細(xì)胞融合 采用眼球摘除放血法處死小鼠,無菌操作取出脾臟,在平皿內(nèi)擠壓研磨,制備脾細(xì)胞懸液。 將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細(xì)胞。
選擇性培養(yǎng) 選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細(xì)胞,一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中,未融合的骨髓瘤細(xì)胞因缺乏次黃嘌呤-*-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,不能利用補救途徑合成DNA而死亡。 未融合的淋巴細(xì)胞雖具有次黃嘌呤-*-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但其本身不能在體外*存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細(xì)胞由于從脾細(xì)胞獲得了次黃嘌呤*磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,并具有骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖的特性,因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。
雜交瘤陽性克隆的篩選與克隆化 在HAT培養(yǎng)基中生長的雜交瘤細(xì)胞,只有少數(shù)是分泌預(yù)定特異性單克隆抗體的細(xì)胞,因此,必須進(jìn)行篩選和克隆化。通常采用有限稀釋法進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)。采用靈敏、快速、特異的免疫學(xué)方法,篩選出能產(chǎn)生所需單克隆抗體的陽性雜交瘤細(xì)胞,并進(jìn)行克隆擴增。經(jīng)過全面鑒定其所分泌單克隆抗體的免疫球蛋白類型、亞類、特異性、親和力、識別抗原的表位及其分子量后,及時進(jìn)行凍存。
單克隆抗體的大量制備 單克隆抗體的大量制備重要采用動物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。
(1)體內(nèi)誘生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石臘或降植烷進(jìn)行預(yù)處理。1-2周后,腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖,并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。
?。?)體外培養(yǎng)法 將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體,收集培養(yǎng)上清液,離心去除細(xì)胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。近年來,各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn),大大提高了抗體的生產(chǎn)量。
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