蔗糖磷酸化酶測(cè)試盒_蔗糖系列_分光光度法
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷鍵，催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等，合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外，SP還能催化合成熊果苷，具有很好的美白效果，在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。
蔗糖磷酸化酶測(cè)試盒_蔗糖系列_分光光度法
測(cè)定原理：
SP能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH，導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測(cè)定340nm吸光度增加速率，即可計(jì)算SP活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體35mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃避光保存，臨用前加6mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃避光保存，臨用前加12mL蒸餾水水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
粗酶液提?。?/p>
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃，離心10min，取上清待測(cè)。
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
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