查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測試盒_花青素合成系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測試盒_花青素合成系列
測定意義:
查爾酮異構(gòu)酶(Chalcone isomerase, CHI)是個被認識的黃酮類化合物合成相關(guān)酶,也是黃酮代謝途徑中的關(guān)鍵酶之一。查爾酮異構(gòu)酶和查爾酮合酶一起構(gòu)成了黃酮類化合物生物合成的限速酶。
測定原理:
查爾酮異構(gòu)酶(CHI)催化查爾酮環(huán)化形成 4,5,7-三羥基黃烷酮,通過測定 381nm 下的吸光度變化表示 CHI 的活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;用時加入 50mL 試劑一充分溶解待用;用不完的試劑 4℃保存。
粗酶液提?。?/p>
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟:
1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 381nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 樣本測定表
在1mL 玻璃比色皿中加入 50µL 上清和 950µL 試劑二,立即混勻并記錄 381nm 下初始吸光值 A1 和 37℃保溫 30min 后的吸光值 A2。計算 ΔA=A2-A1。