亞硝酸還原酶(NiR)測(cè)試盒_氮代謝系列
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
注 意： 正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
硝酸還原酶（NiR）是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶，廣泛存在于微生物及植物體內(nèi)，是自然界氮循環(huán)過(guò)程中的關(guān)鍵酶，可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3，從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累，降低因亞硝酸鹽累積而造成的對(duì)生物體的毒害作用。
亞硝酸還原酶(NiR)測(cè)試盒_氮代謝系列
測(cè)定原理：
亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)亞硝酸還原酶的活性。
需自備的儀器和用品：
天平、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿。
試劑的組成和配制：
提取液：液體80mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加12mL蒸餾水溶解。
試劑三：液體12mL×1瓶，4℃保存。（如出現(xiàn)沉淀可以70-80℃加熱溶解）
試劑四：液體25mL×1瓶，4℃避光保存。（如出現(xiàn)沉淀可以70-80℃加熱溶解）
試劑五：液體25mL×1瓶，4℃避光保存。
工作液：臨用前根據(jù)用量將試劑四和試劑五以1:1的比例混合。
酶液提?。?/p>
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2．細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后10000g，4℃離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
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