其它系列_總皂苷含量測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意 : 正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
皂苷(Saponin)是苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類糖苷,主要分布于陸地高等植物中,也少量存在于海星和海參等海洋生物中。 許多中草藥如人參、遠(yuǎn)志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷還具有抗菌的活性或解熱、鎮(zhèn)靜、抗癌等 有價(jià)值的生物活性。
其它系列_總皂苷含量測(cè)試盒
測(cè)定原理:
使用超聲波提取樣品中的皂苷,利用香-草醛-高氯酸顯色體系測(cè)定總皂苷含量。
所需的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、烘箱、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96 孔板、高氯酸、乙酸、超聲波清洗器
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100ml×1 瓶,4℃保存;
試劑一:24ml×1 瓶,4℃保存;
試劑二:高氯酸,自備;
試劑三:乙酸,自備??傇碥仗崛。?/p>
樣本烘干,粉碎過(guò)篩,稱取 0.05g,加入 1mL 提取液,超聲提取 1h;8000g,25℃離心 10min,
取上清待測(cè)。
測(cè)定步驟:
1、酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 589nm。
2、測(cè)定管:取 0.5mL 上清,70℃揮發(fā)至干。加入 0.2mL 試劑一和 0.8mL 試劑二,55℃水浴
20min。吸取 40μL 加入 96 孔板中,再加入 200μL 試劑三,充分混勻后,589nm 下測(cè)定吸光度 A1。
3、空白管:取 0.5mL 提取液,70℃揮發(fā)至干。加入 0.2mL 試劑一和 0.8mL 試劑二,55℃水浴 20min。吸取 40μL 加入 96 孔板中,再加入 200μL 試劑三,充分混勻后,589nm 下測(cè)定吸光度 A2。計(jì)算△A= A1-A2。
總皂苷含量計(jì)算:
1.以齊-墩果酸為對(duì)照品計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線為:y = 0.0036x - 0.012,R2 = 0.9968,x 為對(duì)照品濃度,μg/mL,y 為吸光度△A。
總皂苷含量(μg/g 干重)=(△A+0.012)÷ 0.0036×V 樣÷(V 樣÷V 樣總×W)
=277.78×(△A+0.012)÷W