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上海博研生物工程研究中心
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更新時(shí)間:2018-04-23 18:37:09瀏覽次數(shù):460次
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穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞,293E進(jìn)口細(xì)胞
形態(tài)特性:上皮樣;多角
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
特征特性:穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞,293E細(xì)胞上皮樣;多角
培養(yǎng)條件: IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法:1:6傳代;2天1次。
傳代情況:不詳
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè):培養(yǎng)法(-)
STR:
Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:18;D19S433:18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
染色體:14~25,51~64,有微核
使用權(quán)限:A類
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客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
操作臺(tái)的滅菌處理:
1)無菌室及無菌操作臺(tái)(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘。
2)細(xì)胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。 (注:實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之*無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
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