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人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2018-06-02 18:10:28瀏覽次數(shù):208次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

卡邁舒化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司專業(yè)致力于各種屬ELISA試劑盒的研發(fā),并無償提供代檢測(cè)服務(wù),是國(guó)內(nèi)多家科研機(jī)構(gòu)及高校的ELISA試劑盒專業(yè)供應(yīng)商,人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒是我司*產(chǎn)品之一,質(zhì)量保證,*,發(fā)貨及時(shí),運(yùn)輸嚴(yán)格,產(chǎn)品得到諸多單位科研工作者的認(rèn)可與支持,更有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)用心為您的科研之路保駕護(hù)航,做您身邊

詳細(xì)介紹

名稱:人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒

規(guī)格:48T/96T

原理:ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)

包括:人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等等

標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒操作流程如下:

1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl?!。?SPAN style="FONT-FAMILY: helvetica">2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。

3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?!?/SPAN>

5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!?/SPAN>

6)洗板,同(4)?!?/SPAN>

7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?!?/SPAN>

8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 

9)洗板,同(4)。 

10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min?!?/SPAN>

11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?!?/SPAN>

12)分別測(cè)450nm 吸光值W1630nm吸光值W2,zui終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

注:所用溶液配方

(1) PBS:稱取0.2g KH2P04, 2.9g Na2HP04?12H20、8.0g NaCl, 0.2g KCl,加雙蒸水至1000ml。

2)包被緩沖液:稱取1.59g Na2CO3, 2.938 NaHCO3,加雙蒸水至 1000m1

3)洗滌液(PBST):含0.05% Tween-20PBS。

4)稀釋液:含0.1%牛血清白蛋白(BSA)PBS,主要用以稀釋抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、樣品。

5TMB顯色液:稱取1.84g Na2HP04.12H20, 0.51 g檸檬酸,加雙蒸水至1O0ml,配成檸檬酸-磷酸緩沖溶液。用10.5 ml 檸檬酸-磷酸緩沖溶液溶解1TMB,再加入35μl 3% H2O2

6)細(xì)胞裂解液:1% TritonX-100,137mmol/L NaCl,20mmol/L Tris-HCl2mmol/L EDTA,1mmol/L PMSF,pH 7.4。(其中PMSF溶于異丙醇中,配成1O mmo/L-20 貯存?zhèn)溆?。保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月

卡邁舒(上海)生物科技有限公司/ Kmaels (Shanghai) biotechnology co., LTD主營(yíng)各種屬Elisa試劑盒,產(chǎn)品服務(wù)于生物科研領(lǐng)域。致力為中國(guó)生命科學(xué)研究領(lǐng)域的科研工作者提供高品質(zhì)產(chǎn)品,產(chǎn)品囊括細(xì)胞因子系列,內(nèi)分泌系列,特種蛋白系列,腫瘤以及自身免疫系列等多個(gè)優(yōu)勢(shì)系列。產(chǎn)品種類齊全指標(biāo)上千萬種,原料均采用進(jìn)口試劑,引進(jìn)國(guó)外生產(chǎn)工藝,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,性價(jià)比高,深受廣大用戶的信賴。

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關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱

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