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當(dāng)前位置:上海一研生物科技有限公司>>ATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>> 乳腺癌細(xì)胞;BC-020
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所 在 地上海市
更新時間:2021-04-07 14:57:51瀏覽次數(shù):871次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
乳腺癌細(xì)胞;BC-020 | 貼壁生長 | EY-X63669 |
細(xì)胞名稱 乳腺癌細(xì)胞;BC-020
形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: BC-020乳腺癌細(xì)胞由中國人種乳腺癌組織經(jīng)培養(yǎng)選擇獲得,于2007年建立鑒定,是乳腺癌基礎(chǔ)研究和臨床研究的材料。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C30
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Lupanine
CAS No.:550-90-3
中文名:白金雀兒
分子式:C15H24N2O
腺嘌呤;Adenine 訂購|咨詢 神經(jīng)絲束蛋白(NPTN) 規(guī)格: 20mg
香; Coumarin 訂購|咨詢 神經(jīng)絲蛋白3(NEF3) 規(guī)格: 20mg
五味子素;Schisandrin B 訂購|咨詢 神經(jīng)絲蛋白3(NEF3) 規(guī)格: 20mg
商陸皂苷;Esculentoside 訂購|咨詢 神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1) 規(guī)格: 20mg
R三七皂苷R2 ; Rtogi 訂購|咨詢 神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1) 規(guī)格: 20mg
三聚;Melamine 訂購|咨詢 神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1) 規(guī)格: 200mg
日蟾蜍他靈;Gamabufotalin 訂購|咨詢 神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白2(NRP2) 規(guī)格: 10mg
羥基異亮;4Hydroxyisol 訂購|咨詢 神經(jīng)纖維素1(NF1) 規(guī)格: 20mg
7羥基馬兜鈴 A;7hydroxy 訂購|咨詢 神經(jīng)纖維素2(NF2) 規(guī)格: 10mg
蒲公英甾醋酯;Taraxastery 訂購|咨詢 神經(jīng)纖維素2(NF2) 規(guī)格: 10mg
泊金;Propylparaben 訂購|咨詢 神經(jīng)束蛋白(NFASC) 規(guī)格: 20mg
馬兜鈴 C ;Aristolochic 訂購|咨詢 神經(jīng)連接蛋白1(NLGN1) 規(guī)格: 20mg
賴;LLysine 訂購|咨詢 神經(jīng)連接蛋白2(NLGN2) 規(guī)格: 20mg
;Alserin 訂購|咨詢 神經(jīng)連接蛋白3(NLGN3) 規(guī)格: 20mg
苦參;Matrine 訂購|咨詢 神經(jīng)軟骨蛋白(NCDN) 規(guī)格: 20mg
京平;Genipin 訂購|咨詢 神經(jīng)軟骨蛋白(NCDN) 規(guī)格: 20mg
葫蘆巴;Trigonelline 訂購|咨詢 神經(jīng)肽B(NPB) 規(guī)格: 20mg
胡黃連苷Ⅱ;Picroside Ⅱ 訂購|咨詢 神經(jīng)肽FF(NPFF) 規(guī)格: 20mg
HSD17B1/HSD17 羥類固脫氫酶17β抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Sparfloxacin
BG1/H1 腦環(huán)核苷門控通道蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Sparfloxacin
BCAS3 癌相關(guān)蛋白3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Afloqualone
MRGX1/MRGPRC/SNSR G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Afloqualone
TSPY1 特異定蛋白質(zhì)編碼Y1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Sufacetamide sodium
DDCT/DDT D型多巴色素脫羧酶 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sufacetamide sodium
Cyclophilin B 親環(huán)蛋白PPIB抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sulpiride
BCAS2 癌相關(guān)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Tadalafil
偶異丁基甲酰 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:CABN 含量:AR,95%
偶熒光桃紅 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Azophloxine 含量:IND
鈀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Palladium 含量:BR,99%
鈀碳鈣 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Palladiumoncarbonhydrogenation 含量:CP
哌芐青 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Piperacillinsodiumsalt 含量:53000~212000,凍干粉
N,N'二(2羥基磺)二 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:POPSONa 含量:AR,99%
N,N雙(2羥基磺) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:POPSO 含量:BR,95%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Pip 含量:GR,99%
派洛寧G 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:PyroninY 含量:高純,98%
硼氟鉀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Potassiumfluoborate 含量:AR,98%
乳腺癌細(xì)胞;BC-020梭菌增菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計數(shù)
甘露糖規(guī)格:20支詳情介紹
四硫磺鹽煌綠增菌液基礎(chǔ)(TTB)規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
粘液鹽測試肉湯規(guī)格:1ml*20支詳情介紹
性蛋白胨水規(guī)格:250g用途:用于弧菌選擇性增菌培養(yǎng)。
BCYE 瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:100g用途:用于軍團(tuán)菌的選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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