一、使用前的技術(shù)準(zhǔn)備
1. 上崗前的技術(shù)培訓(xùn):SFM— 2000L等發(fā)酵罐是機電一體化的設(shè)備,因此;操作人員上崗前必須進行技術(shù)培訓(xùn),使他們熟悉整個系統(tǒng)的工作原理、管路、閥門的操作程序,并對空壓機,蒸汽鍋爐、變頻電機等設(shè)備,能正確操作使用。未經(jīng)培訓(xùn)的人員,不得單獨上崗操作。
2. 設(shè)備使用之前,應(yīng)先檢查電源是否正常,空壓機、微機控制系統(tǒng)、循環(huán)水系統(tǒng)是否能正常工作。
3. 檢查系統(tǒng)上的閥門、接頭及緊固螺釘是否擰緊。
4. 開動空壓機,用0.15Mpa壓力,檢查種子罐、發(fā)酵罐、過濾器、管路、閥門的密封性能是否良好。
二、空消
在投料前,氣路、料路、種子罐、發(fā)酵罐、堿罐、消泡罐必須用蒸汽進行滅菌,消除所有死角的雜菌,保證系統(tǒng)處于無菌狀態(tài)。
1. 空氣管路的空消
(1) 空氣管路上有三級預(yù)過濾器,冷干機和除菌過濾器。預(yù)過濾器和冷干機不能用蒸汽滅菌,因此在空氣管路通蒸汽前,必須將通向預(yù)過濾器的閥門關(guān)閉,使蒸汽通過減壓閥、蒸汽過濾器然后進入除菌過濾器。
2. 種子罐、發(fā)酵罐、堿罐及消泡罐空消
(1) 種子罐、發(fā)酵罐、堿罐及消泡罐是將蒸汽直接通入罐內(nèi)進行空消。
(2) 空消時,應(yīng)將罐上的接種口,排氣閥,及料路閥門微微打開,使蒸汽通過這些閥門排出,同時保持罐壓為0.13~0.15Mpa。
(3) 空消時間為30~40分鐘,特殊情況下,可采用間歇空消。
三、實消
實消是當(dāng)罐內(nèi)加入培養(yǎng)基后,用蒸汽對培養(yǎng)基進行滅菌的過程,種子罐、堿罐、消泡罐和發(fā)酵罐實消的操作過程相同。
1. 空消結(jié)束后,應(yīng)盡快將配好的培養(yǎng)基從加料口加入罐內(nèi),此時夾套內(nèi)應(yīng)無冷卻水。
2. 培養(yǎng)基在進罐之前,應(yīng)先糊化,一般培養(yǎng)基的配方量以罐體全容積的70%左右計算(泡沫多的培養(yǎng)基為65%左右,泡沫少的培養(yǎng)基可達75~80%),考慮到冷凝水和接種量因素,加水量為罐體全容積的50%左右,加水量的多少與培養(yǎng)基溫度和蒸汽壓力等因素有關(guān),需在實踐中摸索。
3. 先開啟機械攪拌裝置,使罐內(nèi)物料均勻混合,轉(zhuǎn)速50~100rpm。
四、種子罐接種、培養(yǎng)
1. 本設(shè)備采用火焰封口接種,接種前應(yīng)事先準(zhǔn)備好酒精棉花、鉗子、鑷子和接種環(huán)。
2. 菌種裝入三角燒瓶內(nèi),接種量根據(jù)工藝要求確定。
3. 將酒精棉花圍在接種口周圍點燃,用鉗子或鐵棒擰開接種口,此時應(yīng)向罐內(nèi)通氣,使接種口有空氣排出。
五、移種
1. 本設(shè)備采用壓差移種,即在種子罐壓力大于發(fā)酵罐壓力的條件下將種子轉(zhuǎn)移到發(fā)酵罐內(nèi)。
2. 發(fā)酵罐經(jīng)實消冷卻到接種溫度后即可移種。
3. 移種前,對移種管路,閥門用蒸汽滅菌20分鐘。
4. 移種時,種子罐保持0.08Mpa,發(fā)酵罐保持0.03Mpa,打開移種管路上的閥門,種子在壓差作用下,由種子罐轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐。
六、發(fā)酵罐的培養(yǎng)
1. 種子接入發(fā)酵罐后,即可進行控溫培養(yǎng),罐壓一般控制在0.05Mpa,轉(zhuǎn)速根據(jù)各自工藝要求而定。
2. 發(fā)酵溫度根據(jù)工藝要求而定,通過調(diào)節(jié)循環(huán)水的溫度來控制發(fā)酵溫度,當(dāng)環(huán)境溫度高于發(fā)酵溫度時,用冷水降溫。
3. 發(fā)酵液的PH值是根據(jù)工藝要求而定,當(dāng)需要調(diào)整PH值時,逐步加入酸堿液,直至所需PH值。
4. 在發(fā)酵中途要取樣檢查時,可通過取樣口取樣。取樣前,取樣管路閥門需用蒸汽滅菌,防止雜菌污染而引起誤導(dǎo),取樣結(jié)束后同樣要用蒸汽沖洗取樣管道閥門。
七、出料
1. 本設(shè)備的出料是利用罐壓將發(fā)酵液從出料管道排出,根據(jù)發(fā)酵液的濃度,罐壓可控制在0.05~0.1Mpa。
2. 出料后取出溶氧、PH儀,進行清洗保養(yǎng)。
八. 維修與保養(yǎng)
1. 安置設(shè)備的環(huán)境應(yīng)整潔、干燥、通風(fēng)良好,水、汽不得直接潑到電器上。
2. 設(shè)備啟用之后,必須及時清洗,防止發(fā)酵液干結(jié)在發(fā)酵罐及管路、閥門內(nèi)。
3. 各類儀表,應(yīng)按規(guī)定要求保養(yǎng)存放 壓力表、安全閥、溫度儀每年應(yīng)校準(zhǔn)一次。
4. 設(shè)備停止使用時應(yīng)清洗、吹干。過濾器的濾芯應(yīng)取出清洗,涼干,妥善保管,法蘭壓緊螺母應(yīng)松開,防止密封圈*變形。
九. 特別注意事項
1. 在發(fā)酵過程中,嚴禁將過濾器的排水閥突然打開而引起發(fā)酵液倒流。
2. 當(dāng)突然停電時,應(yīng)迅速關(guān)閉發(fā)酵罐及空氣系統(tǒng)進,排氣閥,保持罐壓和空氣系統(tǒng)不造成負壓。