兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒
ELISA質(zhì)量保證是一個復雜的過程,許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質(zhì)量 一、方法學的影響 ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,結果重復性較差,質(zhì)量較難控制。 二、試劑因素 不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量**,即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復雜過程,并且能夠保證結果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復凍融造成試劑的失效。 三、樣本因素 標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、*等,后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。 四、操作因素對ELISA結果的影響 ELISA操作步驟復雜,操作不當將引起較大的誤差。以下敘述各個步驟中的影響因素。 1.加樣 2.溫育 3.洗滌 4.顯色 5.比色 五、灰區(qū)的設置 通常情況下,ELISA定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定結果報告的依據(jù)。 六、標本復查 ELISA手工檢測過程復雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結果的差異,因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法,比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結果進行復查。 七、結果判斷和報告 常用下列幾種方法表示結果: 1.定性測定 2.半定量測定 結果一般以滴度表示。 3.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,繪制標準曲線,結果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線。 4.結果報告 每個試劑盒操作是不同的,請按說明書操作。具體事項請!