臺(tái)盼藍(lán)細(xì)胞凋亡與增殖

商品介紹：

臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue），一種偶氮、親水性酸性藍(lán)色染料，可透過死亡細(xì)胞和垂死細(xì)胞的細(xì)胞膜，將其染成藍(lán)色，而活細(xì)胞由于其細(xì)胞膜的完整性，可將臺(tái)盼藍(lán)排斥在外，因此，通過顏色的變化即可將活細(xì)胞（活細(xì)胞呈透明無色）和死細(xì)胞鑒別開來，基于此原理，本品廣泛用于細(xì)胞活性水平的常規(guī)評估。細(xì)胞計(jì)數(shù)前，需要用生理鹽緩沖液或者無血清培養(yǎng)基對細(xì)胞進(jìn)行充分的清洗，因?yàn)榧?xì)胞對血清蛋白具有非常高的親和力，因此殘留的血清蛋白會(huì)導(dǎo)致較暗的染色背景。

商品屬性：

臺(tái)盼藍(lán)還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺(tái)盼藍(lán)與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外，臺(tái)盼藍(lán)（合適濃度）還常用來淬滅細(xì)胞表面的自熒光或者其他熒光信號。

本品為細(xì)胞培養(yǎng)級別，臺(tái)盼藍(lán)染色法主要用來鑒定組織分離到原代細(xì)胞的存活情況。只需3-5min染色，即可通過血球計(jì)數(shù)法分析結(jié)果。

中文別名：直接藍(lán)14;錐蟲藍(lán);曲利苯藍(lán)

英文別名：Direct Blue 14; Dianil blue; Diaminine Blue

CAS：72-57-1

分子式：C34H24N6Na4O14S4

分子量：960.81

外觀：棕色至黑褐色、黑色、黑褐色粉末

組分：染料含量，>40%

溶解性：溶于水（10mg/ml）

儲(chǔ)存條件：室溫

步驟和注意事項(xiàng)：?

準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境：?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計(jì)數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時(shí)，?只計(jì)左側(cè)和上方者，?不計(jì)右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時(shí)登記購買耗材或試劑，?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：