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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	外周血
貨號	CS-X3244	細胞形態(tài)	圓形

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3244	組織來源	外周血
傳代特性	不增殖；不傳代	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態(tài)	圓形	生長特性	懸浮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

大鼠外周血中性粒細胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：大鼠外周血中性粒細胞
2.組織來源：外周血

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠外周血中性粒細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞是一類無色、球形、有核的血細胞。白細胞不是一個均一的細胞群，根據(jù)其形態(tài)、功能和來源部位可以分為三大類：粒細胞、單核細胞和淋巴細胞，其中粒細胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同，分為中性粒細胞、嗜酸粒細胞和嗜堿粒細胞三種。中性粒細胞是在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色，有許多彌散分布的細小的（0.2～0.4微米）淺紅或淺紫色的顆粒。細胞核呈桿狀或2～5分葉狀，葉與葉間有細絲相連。中性粒細胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細胞來源于骨髓，具有分葉形或桿狀的核，胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細顆粒。這些顆粒多是溶酶體，內(nèi)含髓過氧化酶、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類，與細胞的吞噬和消化功能有關(guān)。中性粒細胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用，它處于機體抵御微生物病原體，特別是在化膿性細菌入侵的第一線，具有很強的吞噬活性，可吞噬細菌、衰老的紅細胞、抗原一抗體復(fù)合物和壞死的細胞等。中性粒細胞內(nèi)含有大量溶酶體酶，因此能將吞噬入細胞內(nèi)的細菌和組織碎片分解。當(dāng)中性粒細胞吞噬數(shù)十個細菌后，自身發(fā)生解體，所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。中性粒細胞是人體內(nèi)壽命短的細胞，一般體外培養(yǎng)12-24h內(nèi)活性穩(wěn)定，48h活性下降，96h基本死亡。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠外周血中性粒細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠外周血中性粒細胞經(jīng)瑞氏染色法，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性懸浮

細胞形態(tài) 圓形

傳代特性不增殖；不傳代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

大鼠外周血中性粒細胞

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠多巴胺神經(jīng)元細胞	人鈣調(diào)su特異抗體(CAM-ab)試劑盒ELISA
QGY-7701 (人肝癌細胞)	人假定蛋白LOC677340試劑盒ELISA
Raji (人Burkitt's淋巴瘤細胞)	人蛋白 DJ-1(PARK7)ELISA檢測試劑盒
RAW 264.7 (小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)	人Toll樣受體5(TLR5)ELISA檢測試劑盒
RBE (人肝膽管癌細胞)	兔痘病毒PCR試劑盒
RBL-2H3 (大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)	麥芽香肉桿菌PCR檢測試劑盒
RD (人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞)	豬皰疹病毒PCR檢測試劑盒
RF/6A (猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞)	登革熱病毒Ⅰ、Ⅱ型PCR檢測試劑盒
RH-35 (大鼠肝癌細胞)	馬鼻肺炎病毒PCR試劑盒
RKO (人結(jié)腸腺癌細胞)	禽類支原體通用PCR試劑盒
RL95-2 (人子宮內(nèi)膜癌細胞)	病毒H7N9亞型(AIV-H7N9)核suan檢測試劑盒
RSC96 (大鼠雪旺細胞)	馬蛔蟲PCR試劑盒
RM-1 (小鼠前列腺癌細胞)	大鼠外周血中性粒細胞麻風(fēng)桿菌PCR檢測試劑盒
RWPE-1 (人正常前列腺上皮細胞)	禽結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒
S-180 (小鼠腹水瘤細胞)	新城疫病毒中強毒(NDV-W)核suan檢測試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。