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當(dāng)前位置:上海宸功生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞株>> 牛胚氣管細(xì)胞
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時(shí)間:2016-06-23 10:18:53瀏覽次數(shù):359次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線牛胚氣管細(xì)胞購買細(xì)胞注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
2.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們
4.靜置細(xì)胞貼壁后,請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL維持細(xì)胞正常培養(yǎng),待細(xì)胞匯合度 90%左右時(shí)正常傳代。
5.請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6.建議客戶收到細(xì)胞后前 3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通交流。
細(xì)胞名稱:牛胚氣管細(xì)胞
培養(yǎng)條件:MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
英文簡稱:EBTr (NBL-4)
種屬:牛
1.取出細(xì)胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.細(xì)胞傳代:吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,用 PBS清洗細(xì)胞一次。
4.加入0.125%胰蛋白酶消化液約 1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃消化 3min左右;顯微鏡下
觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化。
5.用吸管輕輕吹打混勻,按 1:2或 1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的
*培養(yǎng)基至 5mL,放入 37℃ 5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
6.待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察,每隔 2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
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