MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)

MKRed核酸凝膠染料（效果同GelRed，DuRed）

產(chǎn)品關(guān)鍵詞：

MKRed 核酸凝膠染料；GelRed；DuRed；Ethidium Bromide, EB；Ames Test 艾姆斯試驗(yàn)法；GoldView；SYBR Green I；

訂購信息：【活動(dòng)期間按照活動(dòng)價(jià)執(zhí)行】

產(chǎn)品特征

。。。傳統(tǒng)核酸染料（Ethidium Bromide, EB，溴化乙錠）的無毒安全替代品，經(jīng)艾姆斯試驗(yàn)法測(cè)試認(rèn)證。

。。。新型核酸染料（GelRed，DuRed）的同等優(yōu)質(zhì)替代品，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部測(cè)試認(rèn)證【見圖1】。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

。。。安全無毒：*油性大分子，無法穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞；不易揮發(fā)，人體不會(huì)吸入；艾姆斯試驗(yàn)法（Ames Test）表明凝膠染色濃度下*沒有誘變性，與EB的強(qiáng)致癌性相比，是一種安全無毒的核酸染料。

。。。適用范圍廣：適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳的dsDNA, ssDNA以及RNA染色。

。。。操作靈活簡(jiǎn)單：可選擇電泳前（膠染法）或電泳后（泡染法）染色。使用方法同EB，GelRed，DuRed

。。。檢測(cè)方便：與EB具相同的光譜特征，使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀即可，無需更改濾光片和觀察裝置。標(biāo)準(zhǔn)EB濾光片或SYBR濾光片都適用。

。。。靈敏度高，對(duì)核酸遷移影響?。哼m用于各種大小片段的電泳染色。電泳條帶不易*，片段不易遷移，不像SYBR Green I，染料濃度高時(shí)會(huì)引起條帶彎曲和遷移現(xiàn)象【見附件 常見核酸染料的性能比較】。

。。。穩(wěn)定性高：室溫穩(wěn)定保存一年，長期不用可置于+4℃保存二年。

。。。易去除，兼容性強(qiáng)：用酚/lv仿提取和乙醇沉淀，或商業(yè)化的膠回收試劑盒可輕易去除核酸中的染料；與常見的下游應(yīng)用如克隆，連接和測(cè)序兼容。

應(yīng)用示例：

圖1. GelRed（Biotium）與MKRed（MKbio, Shanghai）的使用比較。1-6是不同上樣量的Marker III（依次為100ng、50ng、12.5ng、6.25ng、3.125ng）；7-11是不同上樣量的血液基因組DNA（依次為200ng、150ng、100ng、50ng、25g）。凝膠配制條件：往25ml凝膠溶液加入0.25g瓊脂糖，微波爐加熱至充分溶解，冷卻至60℃左右，加入2μl GelRed或MKRed染料，混勻，倒膠。電泳條件：1%瓊脂糖凝膠，150V，20min。

圖2. EB（MPbio, USA）與MKRed（MKbio, Shanghai）的使用比較。1-5是不同管菌液的PCR產(chǎn)物（目的片段500bp左右）。凝膠配制條件：往20ml凝膠溶液加入0.2g瓊脂糖，微波爐加熱至充分溶解，冷卻至60℃左右，加入2μl EB或MKRed染料，混勻，倒膠。電泳條件：1%瓊脂糖凝膠，150V，25min。

常用核酸染料的性能比較

保存與運(yùn)輸方法

保存：+4℃避光干燥保存，2年有效。

運(yùn)輸：室溫運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)

1. MKRed雖然為安全無毒的核酸染料，對(duì)人無傷害，但請(qǐng)科研人員操作過程中注意防護(hù)，盡量避免與染料的直接接觸。且染料的廢棄需符合當(dāng)?shù)匾?guī)定。

2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、膠染法（同EB，電泳前染色）

1. 制膠時(shí)加入MKRed 核酸染料（每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL MKRed 10,000×水溶液）。

2. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

3. 用普通紫外凝膠透射儀（300nm處有zui加激發(fā)）觀察以及標(biāo)準(zhǔn)EB濾光片成像。

【注意】

1. 此方法比較節(jié)省染料，500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。

2. 由于MKRed具有良好的熱穩(wěn)定性，可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將MKRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中，然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。

3. MKRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。

4. 含有染料的預(yù)制凝膠溶液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。

5. 如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認(rèn)問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在，則說明問題與染料無關(guān)，請(qǐng)嘗試：降低瓊脂糖濃度；選用更長的凝膠；延長凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰；改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。

6. 膠染法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠，對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。

二、泡染法（電泳后染色）

1. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

2. 用H₂O將MKRed 10,000×水溶液稀釋約3,300倍制成3× 染色液（例如：將15μL MKRed 10,000×水溶液和5mL 1M NaCl混合，之后加到45mL H₂O中混勻）。【注意】：染色液中加入0.1M NaCl能提高靈敏度，但如果膠染色再次使用會(huì)比較容易有沉淀產(chǎn)生。

3. 將凝膠小心地放入合適的容器中，緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右，zui加染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5～10％丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝膠，染色時(shí)間通常介于30min-1h，丙烯酰胺含量增加，染色時(shí)間延長。

4. 不需要脫色，但若有需要可用水清洗一下凝膠以降低背景。

5. 用普通紫外凝膠透射儀（300nm處有zui加激發(fā)）觀察以及標(biāo)準(zhǔn)EB濾光片成像。

【注意】

1. 用泡染法染色時(shí)，染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。

2. 3× MKRed染色液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。

常見問題【見懋康內(nèi)容】

1. MKRed能用于ssDNA或RNA染色嗎？

2. MKRed與下游應(yīng)用如克隆，連接或測(cè)序兼容嗎？

3. MKRed與什么上樣緩沖液兼容？

4. 是否能將MKRed加入DNA中，然后進(jìn)行電泳檢測(cè)？使用濃度多少？

5. 哪種發(fā)射濾片適用于MKRed？

6. 電泳后的MKRed預(yù)制膠能重復(fù)使用？

7. MKRed的工作原理是什么？化學(xué)結(jié)構(gòu)是什么？

8. 電泳過程中MKRed會(huì)發(fā)生遷移嗎？

9. MKRed需要避光使用嗎？

10. 不小心將MKRed暴露在室內(nèi)光下，是否還能用？

11. MKRed能用于甲醛、聚丙烯酰胺、DGGE、EMSA或PFGE凝膠？

12. MKRed能用于彗星實(shí)驗(yàn)（COMET assay）？

——Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

MKRed核酸凝膠染料 核酸純化

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