DH5α Chemically Competent Cell

大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品訂購：更大包裝或產(chǎn)品技術(shù)問題

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產(chǎn)品組分：

菌株描述

DH5α是實(shí)驗(yàn)室常用的一種質(zhì)?？寺∮镁?，其φ80lacZ△M15基因的產(chǎn)物可與載體編碼的 β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ)，可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。特別適用于高效的質(zhì)粒DNA克隆并能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制。

DH5α菌株基因型：F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi-1 gyrA96 relA1 phoA

產(chǎn)品描述

本品是大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。

注意事項(xiàng)

1）   感受態(tài)細(xì)胞必須用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在-80℃保存，不可反復(fù)凍融且放置時(shí)間過長，否則會(huì)減低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。

2）   號(hào)在冰上融化感受態(tài)細(xì)胞。

3）   進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí)，需在相應(yīng)溫度及無菌條件下進(jìn)行。

4）   為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可保留部分連接反應(yīng)液以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到低。

5）   產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(0.1ng/μl)，供對照實(shí)驗(yàn)用。

6）   為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行】

1）   取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，如需分裝可將剛剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無菌預(yù)冷的離心管內(nèi)，置于冰浴中?！咀⒁猓阂淮无D(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。需注意所用DNA體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一?！?/span>

【注意】：

a）涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA總量較多，可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；反之，若轉(zhuǎn)化的DNA總量較少，可取200-300 μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計(jì)的克隆較少，可通過離心（4,000 rpm，2min）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。

b）新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。

c）涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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DH5α化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

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