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上海澤葉生物科技有限公司
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閱讀：1801發(fā)布時間：2016-12-12
INTERFERin™-HTS
--polyplus新型轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品優(yōu)勢：
》 適用于siRNA的高通量轉(zhuǎn)染
》 具有高重復性的結(jié)果
》 10 ~50 nM siRNA可達沉默效率
》 高性價比——每孔所用轉(zhuǎn)染試劑較少，實驗花費少
》 可進行正向、反向和批量操作，與血清和抗生素兼容
》 貯存方便：試劑為水溶液，4度可保存一年
INTERFERin™-HTS是新一代siRNA轉(zhuǎn)染試劑，特別針對高通量應用而研發(fā)，利用較少的試劑即可達到高基因沉默效率、高重復性結(jié)果和*的細胞活性。INTERFERin™-HTS 性價比高、操作簡便、與血清和抗生素兼容，可在96孔板和384孔板進行正向、反向和批量操作。
高基因沉默效率、低細胞毒性
使用INTERFERin™-HTS轉(zhuǎn)染10 nM PLK1-siRNA，進行細胞死亡誘導的表型分析，實驗結(jié)果表明該基因沉默能夠誘導90%以上的細胞死亡（圖1）。同時，INTERFERin™-HTS轉(zhuǎn)染不帶目的基因的siRNA 的實驗表明該轉(zhuǎn)染試劑的細胞毒性很?。?9% ± 7%的細胞活性）。
圖1. 在384孔板中INTERFERin™-HTS將siRNA轉(zhuǎn)染到 Hela細胞，的誘導細胞死亡
誘導細胞死亡的siRNA (PLK1， 0.05Ul) 反向轉(zhuǎn)染Hela細胞， 陰性對照為不帶目的基因siRNA （0.05uL），轉(zhuǎn)染后72小時，通過熒光顯微鏡檢測細胞活性。
高重復性結(jié)果
INTERFERin™-HTS在不同水平的高重復性結(jié)果：
不同孔間 ? 每個樣本進行三個復孔實驗，結(jié)果顯示各樣本的復孔間差異極小，可取三復孔間任一數(shù)據(jù)作為實驗結(jié)果（圖1）
不同實驗間 ?利用同一批次的INTERFERin™-HTS進行三個單獨的轉(zhuǎn)染實驗，顯示出相同的沉默效率（圖2）
不同批次間 ?利用三個不同批次的INTERFERin™-HTS進行轉(zhuǎn)染顯示出高度一致的結(jié)果（圖3）
圖2. 96孔板中不同實驗間的重復性結(jié)果
在3個不同的實驗中，用INTERFERin™-HTS將10 nM GL3Luc siRNA轉(zhuǎn)染到能夠穩(wěn)定表達熒光素酶基因的A549細胞，以0.05 μL的INTERFERin™-HTS做陰性對照。轉(zhuǎn)染后48小時檢測熒光素酶表達。
圖3. 96孔板中不同批次間的重復性結(jié)果
用3個不同批次的INTERFERin™-HTS將10 nM GL3Luc siRNA轉(zhuǎn)染到能夠穩(wěn)定表達熒光素酶基因的A549細胞， 0.05 μL的INTERFERin™-HTS做陰性對照。轉(zhuǎn)染后48小時檢測熒光素酶表達。
高基因沉默效率
用INTERFERin™-HTS轉(zhuǎn)染內(nèi)源性的lamin A/C siRNA，其基因沉默效率高于目前市場上的另外三個常規(guī)轉(zhuǎn)染試劑。
圖4. 與其他同類試劑比較， INTERFERin™-HTS轉(zhuǎn)染siRNA 的沉默效率更高
在96孔板中， 用10 nM lamin A/C siRNA反向轉(zhuǎn)染Hela細胞， 24小時后通過分支DNA分析檢測lamin A/C的表達，用GAPDH作對照。
*的性價比
與其它同類試劑比較，使用較少量的INTERFERin™-HTS即可獲得基因表達的高沉默率；同規(guī)格條件下，該試劑可轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)板數(shù)至少為其它試劑的2倍。
表1. 96孔板中每孔所需試劑體積（INTERFERin™-HTS和其它同類試劑）和1.5 mL試劑所能轉(zhuǎn)染的板數(shù)，實驗采用siRNA的反向轉(zhuǎn)染。
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