一.產(chǎn)品簡(jiǎn)介
1、產(chǎn)品名稱:大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
2、組織來(lái)源:大鼠視網(wǎng)膜微血管
3、產(chǎn)品規(guī)格:5×105細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶
.4、細(xì)胞簡(jiǎn)介:
原代細(xì)胞均處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,且每次發(fā)貨為匯合率達(dá)到70%的細(xì)胞,收到細(xì)胞后即可開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。
提供的大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞取自新鮮的組織,按照標(biāo)準(zhǔn)操作流程分離培養(yǎng)。研發(fā)的原代細(xì)胞*培養(yǎng)基能提供細(xì)胞良好的生長(zhǎng)條件,降低雜細(xì)胞污染,保證不同批次間細(xì)胞質(zhì)量的穩(wěn)定。
同時(shí),還建立了嚴(yán)格的細(xì)胞鑒定流程,所提供的原代細(xì)胞均需經(jīng)過(guò)細(xì)胞類型特異性標(biāo)記物、細(xì)胞形態(tài)學(xué)等檢測(cè),保證細(xì)胞純度在90%以上;同時(shí)也需經(jīng)過(guò)微生物檢測(cè),保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細(xì)菌。
二.使用方法
1、您收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%*消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,zui后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞*貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
三.注意事項(xiàng)
1、培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月;
2、在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作;
3、原代培養(yǎng)的細(xì)胞,不建議多次傳代后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如果您的實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng), 請(qǐng)?jiān)谑盏郊?xì)胞后傳代時(shí),按細(xì)胞量分種2瓶,使用其中的一瓶細(xì)胞實(shí)驗(yàn),其余的細(xì)胞先凍存起來(lái)。下次實(shí)驗(yàn)需要時(shí),再?gòu)?fù)蘇;
4、該細(xì)胞只可用于科研;