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上海研盟生物科技有限公司
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上海研盟生物科技有限公司
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時(shí)間：2017-10-20 10:50:31瀏覽次數(shù)：354次
聯(lián)系我時(shí)，請告知來自 環(huán)保在線上海研盟生物提供美國ATCC傳代細(xì)胞株“NCI-H460細(xì)胞,人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞[H460] "，進(jìn)口來源，國內(nèi)保種，活性保證，咨詢：.
【友情提示】：產(chǎn)品價(jià)格與說明書請?zhí)砑涌头騺黼娫儍r(jià)，索要說明書；
產(chǎn)品名稱：NCI-H460細(xì)胞,人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞[H460]
細(xì)胞特性
組織來源：肺；轉(zhuǎn)移灶：肋膜滲出癌
培養(yǎng)條件：RPMI-1640 +10% FBS
形 態(tài)：貼壁；上皮細(xì)胞樣
背 景：NCI-H460細(xì)胞株從一位大細(xì)胞肺癌患者的胸水中建立。細(xì)胞表達(dá)的p53 mRNA易于檢測，其水平與正常肺細(xì)胞相當(dāng)，未表現(xiàn)出DNA總體結(jié)構(gòu)異常。角蛋白和波形蛋白纖維染色陽性，神經(jīng)絲三聯(lián)體蛋白陰性。
含量：>1x10的6次方 個(gè)/mL
污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
基本特性：
描述：（1）所有細(xì)胞株購自ATCC；
（2） 公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株；
（3） 細(xì)胞株數(shù)量約 1000000個(gè)/瓶；
（4） 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
密度超過90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代，提供復(fù)蘇好的細(xì)胞株，貼壁及懸浮細(xì)胞形式，細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿、光澤度好，*，并提供細(xì)胞報(bào)價(jià)、所需培養(yǎng)基、種屬來源、組織來源、形態(tài)、背景資料等。
NCI-H460細(xì)胞,人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞[H460] 復(fù)蘇方法細(xì)胞用途：僅供科研使用。
1．從液氮罐中取出安剖；有時(shí)因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。
2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時(shí)搖動，盡快解凍。
3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。
4．低速離心（500～1000轉(zhuǎn)/分）5分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。
5．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。
我公司認(rèn)為購買細(xì)胞的客戶有培養(yǎng)細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn)，客戶收到細(xì)胞，原瓶里的培養(yǎng)液可以收集繼續(xù)使用，在*次消化傳瓶時(shí)，我們要求客戶留一瓶細(xì)胞繼續(xù)使用我們的培養(yǎng)液，其它瓶的細(xì)胞客戶可使用自己的培養(yǎng)液，這樣可減少由于細(xì)胞不適應(yīng)培養(yǎng)液導(dǎo)致的細(xì)胞問題。
來源有保障（世界*品牌），狀態(tài)且傳代次數(shù)好，經(jīng)測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。每管含有細(xì)胞數(shù)>1000000個(gè)，具有高品質(zhì)、高純度、高穩(wěn)定性等特點(diǎn)，純化技術(shù)保證產(chǎn)品性能。
運(yùn)輸方式：活細(xì)胞運(yùn)輸（T-25 flasks）。
細(xì)胞純度：95%。
細(xì)胞來源：ATCC等。
包裝：內(nèi)層無菌自封袋，防壓泡沫盒，外層防壓保溫氣泡袋，說明書。
用途：本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用，不可應(yīng)用于治療等其他方面。
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存.
NCI-H460細(xì)胞,人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞[H460] 本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM，GIBCO，貨號11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行，zui后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
傳代時(shí)間：2-3天 3-5天
傳代比例：1:2~1:3 1:1~1:2
細(xì)胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)安全性：所有細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。
研盟生物其他優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：
小鼠雜交瘤細(xì)胞，BNP2
小鼠雜交瘤細(xì)胞，BNP3
小鼠雜交瘤細(xì)胞，BRAF
小鼠雜交瘤細(xì)胞，BSA
小鼠雜交瘤細(xì)胞，BTK
小鼠雜交瘤細(xì)胞，Calcyclin
小鼠雜交瘤細(xì)胞，Calreticulin
小鼠雜交瘤細(xì)胞，cAMP
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CANX
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CD10
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CD14
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CD19
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CD20
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