保存溫度
對于我們的許多抗體而言，分裝為小等份在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下凍存是的保存條件。分裝抗體可以zui大限度減少凍融對抗體造成的損壞，還可避免多次從同一管中移取抗體而引入污染。分裝后抗體只可凍融一次，如有剩余，應(yīng)保存在 4 ℃ 下。
收到抗體后，請以 10,000 × g 離心 20 秒，沉降滯留在管蓋螺紋中的溶液，然后分裝抗體并將其轉(zhuǎn)移至低蛋白質(zhì)結(jié)合的微量離心管中。分裝抗體的量取決于您在實(shí)驗(yàn)中常用的量。分裝抗體應(yīng)不少于 10 μL；分裝抗體量越少，濃度就越容易受到蒸發(fā)以及儲存樣品管表面吸附的影響。
在大部分情況下，可在收到抗體之后立即將其保存于 4 ℃ 下，可保存 1 至 2 周。遵循數(shù)據(jù)表上的保存建議非常重要。
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特例
切勿凍存酶偶聯(lián)抗體，而應(yīng)將其保存在 4 ℃ 下。凍融不僅會影響抗體的結(jié)合能力，還會降低酶活性。
偶聯(lián)抗體（無論是偶聯(lián)有熒光染料、酶還是*）應(yīng)保存在深色樣品瓶中或用錫箔紙包裹樣品瓶。暴露于光下會影響偶聯(lián)物的活性。熒光偶聯(lián)物尤其容易發(fā)生光致漂白，因此在實(shí)驗(yàn)各階段都應(yīng)避光保存。
IgG3 同型抗體的*之處在于其解凍后容易形成聚集體，因此應(yīng)始終保存在 4 ℃ 下。
腹水液中可能含有蛋白酶，因此收到后應(yīng)盡快凍存。
?污染
為了防止微生物污染，可將*加入抗體制備物中，*的zui終濃度為 0.02% (w/v)。我們的多款抗體中都含有這種保護(hù)劑，其濃度范圍為 0.02%-0.05%。數(shù)據(jù)表的保存緩沖液部分將對此進(jìn)行說明。
不使用*的情況
如果要用抗體對活細(xì)胞進(jìn)行染色或處理，或者要用抗體進(jìn)行體內(nèi)研究，請務(wù)必使用不含*的制備物。這種抗菌劑對大部分生物體都有毒害作用：它會阻斷細(xì)胞色素電子傳遞系統(tǒng)。
*會干擾涉及胺基的所有偶聯(lián)反應(yīng)，因此必須在進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)之前將其去除。完成偶聯(lián)反應(yīng)之后，可使用*保存抗體。另一種可用的抗菌劑是 0.01% 硫柳汞鈉（硫柳汞），這種物質(zhì)不含伯胺。
抗體溶液中的*可通過滲析或凝膠過濾去除。IgG 的分子量為 150,000 Da（IgM 約為 600,000 Da），*的分子量為 65 Da。截留分子量為 14,000 Da 的微滲析裝置可使疊氮化物順利擴(kuò)散出去，而抗體得以保留。
滲析過程在燒杯中（置于磁力攪拌器上，溫度保持 4 ℃）進(jìn)行，每毫升抗體使用至少 1 升預(yù)冷的 PBS，攪拌滲析裝置 6 小時(shí)。更換 PBS 兩次，每次更換后均攪拌至少 6 小時(shí)。如有可能，所有材料都應(yīng)滅菌，并且應(yīng)在無菌條件下處理所得制備物。
?凍融損壞
反復(fù)凍融可能使抗體變性，導(dǎo)致抗體形成聚集體，從而降低其結(jié)合能力。
對大部分抗體而言，在 -20 ℃ 下保存就已足夠；在 -80 ℃ 下保存并無明顯優(yōu)勢。應(yīng)避免使用無霜冰箱，因?yàn)榇祟惐涞膬鋈谘h(huán)（用于減少霜的形成）正是保存此類抗體需要避免的。出于相同的原因，應(yīng)將抗體樣品瓶放在冰箱中溫度波動(dòng)zui小的區(qū)域，例如抵靠冰箱背板放置而不是置于冰箱門架上。
有些研究人員向抗體中加入冷凍保護(hù)劑甘油（zui終濃度為 50%）以防止凍融損壞；甘油可將冷凝點(diǎn)降至 -20 ℃ 以下。雖然這種方法可用于多種抗體，但我們僅對少數(shù)幾種 Abcam 抗體在這種保存條件下的穩(wěn)定性進(jìn)行了測試，我們僅擔(dān)保遵循數(shù)據(jù)表建議進(jìn)行保存的抗體的性能。我們不建議在 -80 ℃ 下保存含甘油的溶液，因?yàn)樵摐囟鹊陀诟视偷睦淠c(diǎn)。請注意，甘油可能會被細(xì)菌污染。如果加入了甘油或任何冷凍保護(hù)劑，應(yīng)當(dāng)小心操作，確保獲得無菌制備物。
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