上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-09-06 12:56:05瀏覽次數(shù):184
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試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要其他Elisa試劑盒請(qǐng)咨詢銷售人員。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
NRG1 檢測(cè)試劑盒 | NRG1 ELISA kit | 48T/96T | BJ-E2420 |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證",每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測(cè)抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
操作流程:
1待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
2酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
3洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4陰性對(duì)照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)。
12分別測(cè)450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測(cè)得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本s和陰性對(duì)照n的 od值后,計(jì)算s/n值。s/n≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
小鼠M2型同工酶(M2-PK)試劑盒 Chrysophanol 中文名:大黃酚 分子式:C15H10O4 度:99.0%
小鼠(PK)試劑盒 Chrysophanol 中文名:大黃酚 分子式:C15H10O4
小鼠(PK) Chlorpheniramine maleate 113-92-8 中文名: 分子式:C20H23ClN2O4 度:98.0%
小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒 小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒 規(guī)格型號(hào): 小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒、小鼠基轉(zhuǎn)移酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Chrysophanol 481-74-3 中文名:大黃酚 分子式:C15H10O4
小鼠基轉(zhuǎn)移酶(ALT)試劑盒 Chlorotetracycline 57-62-5 中文名: 分子式:C22H23ClN2O8 度:98.0%
異落新婦苷 HPLC≥95% 20mg HumanProteinS 人蛋白S(ProteinS)試劑盒 進(jìn)口分裝
鵝掌楸堿 HPLC≥95% 20mg ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG試劑盒雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒
無(wú)根辛 HPLC≥95% 20mg 載玻片細(xì)胞P21蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
五脂素A 20mg Mousefreefattyacids,FFA小鼠(FFA)試劑盒
苦木西堿J HPLC≥95% 20mg 小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)試劑盒 ,英文名: AGER
棕鱗矢車菊黃酮素 HPLC≥95% 20mg 兔鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)檢測(cè)試劑盒RabbitLebtospiraIgG
反式可母尼醇,濕地 HPLC≥95% 20mg 牛肽Y(NPY)試劑盒 Bovine neuropeptide Y,NPY
靈芝酸S 20mg 英文名稱Humahyroglobulin人甲狀腺球蛋白(TG)
靈芝萜酮二醇 20mg 動(dòng)物多酚氧化酶(polyphenoloxidase;PPO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
(betaD吡喃葡萄糖氧基HPLC≥95% 20mg RatPlateletFactor4,PF-4試劑盒大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒
豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
NRG1 檢測(cè)試劑盒小鼠瘦素(Leptin)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠瘦素(LEP/Leptin)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠瘦素(LEP)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠瘦素(LEP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠受磷蛋白(PLN)elisa檢測(cè)試劑盒