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更新時(shí)間：2018-06-12 15:43:45瀏覽次數(shù)：473次
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超快核酸轉(zhuǎn)膜試劑盒B（尼龍膜）本產(chǎn)品是基于毛細(xì)管轉(zhuǎn)膜法的Southern和Northern印跡膜制備試劑，專門用于從電泳得到的凝膠中制備用于Southern雜交和Northern雜交的印跡膜。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，提供制備5張13×20cm大小的Southern雜交和Northern雜交印跡膜所需要的溶液，不需要用戶單獨(dú)準(zhǔn)備。
超快核酸轉(zhuǎn)膜試劑盒B（尼龍膜）
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊(cè) |
超快核酸轉(zhuǎn)膜試劑盒B（尼龍膜） | 5次 | 詢價(jià) |
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本產(chǎn)品是基于毛細(xì)管轉(zhuǎn)膜法的Southern和Northern印跡膜制備試劑，專門用于從電泳得到的凝膠中制備用于Southern雜交和Northern雜交的印跡膜。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，提供制備5張13×20cm大小的Southern雜交和Northern雜交印跡膜所需要的溶液，不需要用戶單獨(dú)準(zhǔn)備。
2. 快速：轉(zhuǎn)膜過(guò)程只需要1小時(shí)，整個(gè)過(guò)程只需要2.5小時(shí)(對(duì)DNA)或1.5小時(shí)（對(duì)RNA）。
3. 跟硝酸纖維素膜、帶電尼龍膜、中性尼龍膜和PVDF膜兼容。包括Nytron、Gene Screen Plus、Zetabind、Biotrans、Hybond-N、Immobilon等。
4. 使用優(yōu)化的下向轉(zhuǎn)膜法，不但效率比上行轉(zhuǎn)膜法高30%左右，而且條帶彌散度低、分辨率高。
5. 可用瓊脂糖膠（包括脈沖電泳膠，DNA電泳、RNA甲醛膠電泳和RNA戊二醛電泳）和DNA PAGE膠。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過(guò)離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
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