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更新時間:2023-08-11 18:46:10瀏覽次數(shù):141次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線反轉(zhuǎn)錄PCR反轉(zhuǎn)錄PCR(ReverseTranscription,RT-PCR)又稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR
反轉(zhuǎn)錄PCR(Reverse Transcription,RT-PCR)又稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR。其原理是:提取組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增,而獲得目的基因或檢測基因表達。
RT- PCR即逆轉(zhuǎn)錄PCR,是將RNA的逆轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增反應(PCR)相結合的技術。RT-PCR技術靈敏而且用途廣泛,可用于檢測細胞/組織中基因表達水平,細胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列等。RT-PCR使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數(shù)量級,使一些極為微量RNA樣品分析成為可能,該技術主要用于:分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構建RNA高效轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。
反轉(zhuǎn)錄PCR服務流程
1、mRNA抽提
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA鏈
3、PCR擴增雙鏈cDNA
4、純化PCR產(chǎn)物,克隆PCR產(chǎn)物到標準載體測序
5、亞克隆到其他表達載體(可選)
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