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更新時(shí)間：2023-08-11 10:52:30瀏覽次數(shù)：171次
聯(lián)系我時(shí)，請告知來自 環(huán)保在線細(xì)胞活性氧(ROS)檢測利用熒光探針DCFH-DA進(jìn)行活性氧的檢測
利用熒光探針DCFH-DA進(jìn)行活性氧的檢測。DCFH-DA本身沒有熒光，可以自由穿過細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后，可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜，從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF，檢測DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。
| 實(shí)驗(yàn)流程
Step1：制成單細(xì)胞懸液(組織樣本)
Step2：溶血(細(xì)胞樣本無需進(jìn)行此步驟)
Step3：離心去上清
Step4：調(diào)整細(xì)胞密度
Step5：加入相應(yīng)的熒光探針
Step6：孵育
Step7：洗滌后離心去上清
Step8：上機(jī)檢測
| 實(shí)驗(yàn)費(fèi)用 ：根據(jù)客戶檢測需求以及實(shí)驗(yàn)復(fù)雜程度進(jìn)行報(bào)價(jià)
| 客戶注意事項(xiàng)
1.標(biāo)本收集與保存
>> 組織樣品：新鮮組織放入液氮或-70度保存，組織不少于100mg(約綠豆大小)；
>> 培養(yǎng)細(xì)胞：通過細(xì)胞計(jì)數(shù)取不少于2000000個細(xì)胞于EP管，加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑，混勻后保存于冰箱(-70℃，避免反復(fù)凍融)；
>> 血液細(xì)胞標(biāo)本：以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑，保存(-70℃可長期保存，避免反復(fù)凍融)；
>> 血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本：離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管，保存(以上4℃可保存15-20天，-70℃可長期保存，避免反復(fù)凍融)。
2.樣本運(yùn)輸：可選以下任何的一種方式寄送標(biāo)本
>> 組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運(yùn)輸或加入蛋白保護(hù)劑后加冰袋運(yùn)輸；
>> 細(xì)胞樣本也可以直接快件寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染，培養(yǎng)液不漏出，細(xì)胞不要長得太滿，50%左右，灌滿培養(yǎng)液)；
>> 血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保證液體不漏出，視路途遠(yuǎn)近2-3天可到達(dá))。
| 送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
| 樣品類型 | 樣品需求 | 運(yùn)輸條件 |
| 組織 | 離體后組織制成單細(xì)胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 活細(xì)胞 | 樣本量：1*106個細(xì)胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA的抗凝內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
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