 |
上海雅吉生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 培養(yǎng)原代細(xì)胞,細(xì)胞系價(jià)格,耐藥細(xì)胞株,實(shí)時(shí)熒光pcr試劑盒 |
會(huì)員.png)
聯(lián)系電話
15821073967
公司信息
- 聯(lián)系人：
- 高杰
- 電話：
- 021-34661276
- 手機(jī)：
- 15821073967
- 傳真：
- 021-34661275
- 地址：
- 上海市閔行區(qū)元江路5500號(hào)第一幢5658室
- 郵編：
- 網(wǎng)址：
- www.yajimall.com
| 參考價(jià) | ￥ 1800 |
| 訂貨量 | 1 |
- 型號(hào)
- 品牌
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
- 所在地 上海市
更新時(shí)間：2019-05-20 17:52:25瀏覽次數(shù)：165
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是環(huán)保在線上看到的信息，謝謝!
產(chǎn)品規(guī)格：1*10^6個(gè)細(xì)胞/T25
凍存條件:無(wú)血清細(xì)胞凍存液
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。
溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
傳代方法 1:2~1:4傳代
傳代情況： 2天換液
ES2人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞描述：收集瓶子中培養(yǎng)基留作過(guò)渡培養(yǎng)細(xì)胞鋪板是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)又必須掌握的一門技術(shù)，看似簡(jiǎn)單，然而卻經(jīng)常遇到如細(xì)胞居中或者中間稀疏等不均勻分布的現(xiàn)象，結(jié)果就是只能整板扔掉，重新鋪板，既耽擱時(shí)間又浪費(fèi)了細(xì)胞及培養(yǎng)板等資源。歷經(jīng)多次失敗后，你才會(huì)發(fā)現(xiàn)，原來(lái)細(xì)胞鋪板是有規(guī)律可循的，今天我們就聊一聊：細(xì)胞鋪板的3種手法。
首先，我們來(lái)看看細(xì)胞鋪板不均勻的3種常見(jiàn)情況：
1，中間多，周圍少
2，中間少，四周多
3，呈現(xiàn)一坨一坨的狀態(tài)
這么多種不均勻的情況，到底該怎么拯救呢？一起來(lái)看看細(xì)胞鋪板的三種手法：
手法一：均勻單層
要鋪成那種很均勻的單層細(xì)胞，手法如下：
1，細(xì)胞板子先加入一定量(一般是總量培養(yǎng)基的1/5)的培養(yǎng)基，放入孵箱中放置10-20min。
2，在滴入細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞板子與通風(fēng)櫥有一定的角度，沿著板壁的孔邊緣滴入。
3，滴入后，呈“8”字方法搖晃5-8次。
4，置于水平臺(tái)上，放置10-20分鐘
5，放入孵箱。
在細(xì)胞鋪板時(shí)，每一種板子的孔面積有多大，培養(yǎng)的液體量以及加入細(xì)胞量如下：
手法二：中間少，周圍多
其實(shí)細(xì)胞鋪板不一定都需要單個(gè)單個(gè)的那么均勻，比如，做免疫熒光時(shí)，學(xué)霸姐姐喜歡鋪中間少，周圍稍多的板子，
因?yàn)檫@個(gè)樣子可以同時(shí)檢測(cè)到單個(gè)細(xì)胞的形態(tài)，另外又可以照一點(diǎn)低倍的用作于統(tǒng)計(jì)，所有的細(xì)胞都在一個(gè)環(huán)境中。
特別說(shuō)明一下：這里的多也只是相對(duì)于多，細(xì)胞也是單層的。
中間
周圍
要鋪這樣的細(xì)胞樣子，那鋪細(xì)胞時(shí)要注意手法了：
1，細(xì)胞板子不需要提前用培養(yǎng)基潤(rùn)洗，直接從邊上滴入混有細(xì)胞的培養(yǎng)基。
2，放置30s-1min后，前后搖晃5-8次。
3，放在水平臺(tái)上靜置2-5min。
4，放入孵箱。
手法三：中間多，周圍少
學(xué)一般在提取蛋白或者提取RNA的時(shí)候，可以這樣鋪板，因?yàn)橛行┘?xì)胞刮刀不好用，沒(méi)有辦法刮到周圍的。想要鋪中間多，周圍少的板子，手法如下：
1，細(xì)胞板子不需要提前潤(rùn)洗，從中間滴入進(jìn)去后。
2，把板子朝一個(gè)方向順時(shí)針或者逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)3-5圈。
3，水平臺(tái)上靜置2-5min。
4，放入孵箱。
總結(jié)一下：想要細(xì)胞鋪板鋪得好，背景知識(shí)很重要
其實(shí)在鋪細(xì)胞的時(shí)候，你要準(zhǔn)確的知道你所養(yǎng)的細(xì)胞的特性，比如：
1，細(xì)胞的名稱，來(lái)源。
2，細(xì)胞的屬性。
3，細(xì)胞分裂時(shí)間。
還有，主要的是要搞清楚你的細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，還要知道鋪板后多久可以到達(dá)什么細(xì)胞密度。
如果你準(zhǔn)確的掌握了你的細(xì)胞特性，那鋪板是分分鐘搞定的事情。
細(xì)胞鋪板后，細(xì)胞狀態(tài)不好怎么辦？
如果出現(xiàn)這種情況，學(xué)霸姐姐建議你從以下幾個(gè)方面考慮一下原因：
1，用來(lái)鋪板的細(xì)胞狀態(tài)本身就不好。
2，用來(lái)鋪板的細(xì)胞傳代次數(shù)太多，有些老化。
3，胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
4，中和的血清量及時(shí)間不夠。
5，支原體污染。
ES2人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞鋪板是一個(gè)經(jīng)驗(yàn)積累的過(guò)程，你的手法也需要積極的改進(jìn)，不要生搬硬套，也不要一味追求的鋪均勻，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中多思考細(xì)胞本身的特征和屬性，出現(xiàn)問(wèn)題積極解決即可。
