伊萊博生物科技(上海)有限公司
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Masson染色檢測(cè)
一、Masson染色檢測(cè)實(shí)驗(yàn)原理
1.膠原纖維是人體中的結(jié)締組織的主要成分,分布在全身的各個(gè)部位,組成膠原纖維的主要成分是膠原蛋白。新鮮時(shí)呈白色,故一般稱為白色纖維。在HE染色中被染為淡紅色。它的性質(zhì)是具有韌性及緊固性,因此它能夠抵抗的牽拉力而不至于撕裂或拉斷它們常聚集成粗細(xì)不等的束,呈波浪狀。膠原纖維由許多根纖細(xì)的膠原纖維組成。在電鏡下膠原原纖維又由更細(xì)的原纖維構(gòu)成。根據(jù)Kramen和Little所進(jìn)行的電鏡研究證實(shí),膠原纖維是*的,具有橫紋的(重復(fù)期為650)原纖維。當(dāng)存在病變時(shí)這些纖維可發(fā)生變形,常出現(xiàn)的就是膠原纖維的壞死,膠原纖維在稀酸里可發(fā)生膨脹,變成膠樣物。它們能被酸性染料染成深淺不一的粉紅色,這些往往跟淀粉樣物難以區(qū)別。由于它們的屈光率較弱,因而在光學(xué)顯微鏡下,很難與纖維區(qū)別。膠原纖維的分子長(zhǎng)度約為3000,直徑約為14,分子量為300000。
2.膠原纖維的組成:
1) 細(xì)胞內(nèi)合成前膠原蛋白分子,成纖維細(xì)胞攝取合成蛋白質(zhì)所需的氨基酸,包括fuansuan、賴氨酸和ganansuan。在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的核糖體上按照特定的膠厚mRNA的堿基序列,合成前α-多肽鏈。后者邊合成邊進(jìn)入粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中,并在羥化酶的作用下,將肽鏈中的fuansuan和賴氨酸羥化經(jīng)羥化后,三條前α-多肽鏈互相纏繞成繩索狀的前膠原蛋白分子。溶解狀態(tài)的前膠原蛋白分子,兩端未纏繞,呈球狀構(gòu)形,在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔風(fēng)或轉(zhuǎn)移到高爾基復(fù)合體內(nèi)加入糖基后,分泌到細(xì)胞外。
2) 厚膠原蛋白分子的細(xì)胞外聚合。細(xì)胞外的前膠原蛋白分子,在肽內(nèi)切酶的作用下,切去分子兩端球狀構(gòu)表部分,形成厚膠原蛋白分子,粗約1.5nm,長(zhǎng)約300nm,厚膠原蛋白分子平行排列聚合成膠原纖維。聚合時(shí),相互平的相鄰分子錯(cuò)開(kāi)1/4分子長(zhǎng)度,同一排的分子,菌尾相對(duì)并保持距離,聚合成束,于是形成具有64nm周期橫紋的膠原原纖維。聚合時(shí),分子內(nèi),分子間的化學(xué)基因進(jìn)行縮合,交聯(lián),增加厚纖維的穩(wěn)固性。若干膠原原纖維經(jīng)糖蛋白粘合成粗細(xì)子等的膠原纖維。中性自溶型膠原(neutrla-soluble collagen)→醛糖、縮醛類脂/肉豆蔻酸、類脂→不溶型膠原(insoluble collagen)
3.膠原纖維的顯示:
膠原纖維在HE染色法被染成粉紅色,除此之外,它還可以用一些陰離子的染料來(lái)進(jìn)行染色,如用淡綠可把它們?nèi)緸榫G色,用甲苯胺藍(lán)可將其染為藍(lán)色,在網(wǎng)狀纖維染色中,如不加以處理,它又可被染為棕黃色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。在**細(xì)胞化學(xué)染色中,膠原纖維由于含的負(fù)電荷過(guò)多,常導(dǎo)致某些非特異性的染色,應(yīng)特別注意。