STORM（Stochastic Optical Reconstruction Microscopy）隨機(jī)光學(xué)重構(gòu)顯微鏡是單熒光分子照相技術(shù)的延伸成果。受光的衍射局限，非常鄰近的熒光分子的發(fā)光通過(guò)物鏡后，焦平面上的光點(diǎn)是大部分重疊的，如果我們可以使這樣的分子不同時(shí)發(fā)光，并且先后拍攝它們的獨(dú)立發(fā)光圖像，我們就可以將這些發(fā)光點(diǎn)的中心點(diǎn)逐一描繪出來(lái)，重構(gòu)出一幅完整的、高分辨率的圖像。

Ø  STORM超高分辨率顯微鏡是美國(guó)哈佛大學(xué)華人科學(xué)家莊曉威發(fā)明的超高分辨率顯微成像技術(shù)，尼康公司獨(dú)立引進(jìn)這一技術(shù)，在市場(chǎng)上正式推廣“N-STORM”。

Ø  N-STORM的核心優(yōu)勢(shì)在于“Alexa647”這種高量子產(chǎn)率的染料分子的應(yīng)用：N-STORM可以用Alexa405-Alexa647、Cy2-Alexa647、Cy3-Alexa647三種配對(duì)染料標(biāo)記靶分子，通過(guò)配對(duì)的激光交替照射，Alexa647熒光分子可以在暗態(tài)與亮態(tài)之間反復(fù)切換，從而取得單分子照相的條件。N-STORM對(duì)1000幀以上的單分圖像進(jìn)行重構(gòu)，獲得超高分辨率熒光圖像。

超高分辨率顯微鏡

Ø  此外，N-STORM通過(guò)在光路中引入圓柱鏡片，實(shí)現(xiàn)了Z軸上的超高分辨率的成像。

Ø  N-STORM橫向分辨率20nm，縱向分辨率50nm。