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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>其它系列>> 土壤植酸酶測試盒微量法

土壤植酸酶測試盒微量法
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參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時間:2023-12-24 20:19:24瀏覽次數(shù):568評價

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貨號 BK-01S6921
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商品介紹:

測定意義:

植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對環(huán)境的污染,改善營養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價值。

測定原理

植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無機(jī)磷與肌醇衍生物,無機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計算得植酸酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,甲苯(不允許快遞)。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

土壤植酸酶測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6921

11.png 

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

B(4ug)  1ml/支*5

1瓶 NB-4細(xì)胞株 NB-4 低溫運輸和保存

雙料乳糖膽鹽發(fā)酵 Double Lactose Bile Medium 250g

100g β-  β-Amylase 4℃保存

1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X,low salt)  Tris Buffered Saline(TBS),10X,low salt)  常溫保存

25mg 化的牛血清白蛋白 Biotin-BSA -20℃保存

2 ug pThio-His A pThio-His A 低溫運輸,-20℃保存

50支 B(尼龍頭) Uterus Swabs 常溫

2 ug pDsRed2-Express-N1 pDsRed2-Express-N1 低溫運輸,-20℃保存

D-環(huán)溶液  5ml*10

100g 檸檬酸鈉,二水 Sodium Citrate Dihydrate 室溫保存

土壤植酸酶測試盒微量法AIFM3  凋亡誘導(dǎo)因子3抗體 規(guī)格: 0.2ml

HCG/LH/FSH/TSH alpha  人絨毛膜促性激素α亞基抗體(Cg A) 規(guī)格: 0.1ml

CCL24  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白24抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-rabbit IgG/FITC  FITC標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.3ml

CK2  細(xì)胞角蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

GLUT8  葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143)  磷酸化斑聯(lián)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

PFK2/PFKFB3  6磷酸果糖激2抗體 規(guī)格: 0.2ml

GABARAPL1  γ氨基丁酸受體相關(guān)蛋白樣1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Histone H2B  組蛋白H2B抗體 規(guī)格: 0.1ml

HSD11B1/HSD1  羥基類固醇脫11β1抗體 規(guī)格: 0.1ml

DRD2  多巴胺受體D2抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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