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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> 土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒微量法

土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒微量法
  • 土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒微量法
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參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時間:2023-12-25 10:00:13瀏覽次數(shù):779評價

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貨號 BK-01S6849
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本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6849

商品介紹:

測定意義:

土壤參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機化合物的轉(zhuǎn)化,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ACPT在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。

測定原理:

酸性條件下,S-ACPT可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪;在堿性條件下,酪還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;在680nm有特征吸收峰。

所需儀器及設(shè)備:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、雙蒸水

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細胞樣品的準(zhǔn)備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

1瓶 CCC-HEL-1細胞株 CCC-HEL-1 低溫運輸和保存

MEI MEI Medium 1000ml

2 ug pDsRed-Peroxi pDsRed-Peroxi 低溫運輸,-20℃保存

250mL Phosphate Buffer,0.5M, pH8.5  Phosphate Buffer,0.5M, pH8.5  常溫保存

2.5g IPTG干粉 IPTG Powder -20℃保存

2 ug pOTB7 NOXA1 pOTB7 NOXA1 低溫運輸,-20℃保存

尿素  20支

1瓶 WI-38 [WI38]細胞株 WI-38 [WI38] 低溫運輸和保存

煌綠肉湯增菌液基礎(chǔ) Brilliant Green Enrichment Broth Base 250g

5g 乙酸 Iodoacetic Acid  -20℃保存

50T 雞敗血支原體PCR檢測試劑盒   低溫運輸,-20℃保存

土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒微量法Twist2  TWIST蛋白2抗體抗體 規(guī)格: 0.2ml

SRFBP1  清應(yīng)答因子結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCDC129  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白129抗體 規(guī)格: 0.2ml

CHRNA3/AChRα3  堿型乙酰受體α3抗體 規(guī)格: 0.2ml

DRD3  多巴胺受體D3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Myocardin  促管平滑肌細胞分化因子抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-MYPT1 (Thr853)  磷酸化肌球蛋酸抗體 規(guī)格: 0.1ml

CHRNA2(neuronal)  堿型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體 規(guī)格: 0.1ml

β-Amyloid 1-42(CT)  β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體 規(guī)格: 0.1ml

BNC2/Basonuclin 2  堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體 規(guī)格: 0.2ml

PDLIM1  細胞骨架蛋白C端PDLIM1抗體 規(guī)格: 0.2ml

POMT1  蛋白甘露糖基轉(zhuǎn)移1抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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