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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>淀粉系列>> 可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒微量法

可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒微量法
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更新時(shí)間:2023-12-26 15:39:00瀏覽次數(shù):581評(píng)價(jià)

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貨號(hào) BK-01S6685
可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:遠(yuǎn)藤氏瓊脂 英文名稱:Endo Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基 英文名稱:Lactose Peptone Semisolid Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 胰蛋白胨水培養(yǎng)基 英文名稱:Trytone Water medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基(B法) 英文名稱:Power - nitrate

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6685

商品介紹:

測(cè)定意義:

SSSEC 2.4.1.21)通常以游離態(tài)存在于質(zhì)體基質(zhì)中,催化淀粉鏈延長(zhǎng),主要負(fù)責(zé)支鏈淀粉的合成。

測(cè)定原理

SSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP,在反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,NADPH生成量與前一步反應(yīng)中ADP生成量呈正比,340nm下測(cè)定NADPH增加量即可計(jì)算SSS活性。

需自備的的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

25mL Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (reducing,4X)   Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (reducing,4X)   常溫保存

30次 石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒 FFPE WGA Kit -20℃保存

2 ug pAD-TRAF pAD-TRAF 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

可溶性淀粉瓊脂 Soluble Starch Agar 250g

1瓶 OP9細(xì)胞株 OP9 低溫運(yùn)輸和保存

MI瓊脂培養(yǎng)基平板  9cm*10個(gè)

5g 溴藍(lán) Bromophenol Blue 室溫干燥保存

125mL Triton Lysis Buffer,2X  Triton Lysis Buffer,2X  常溫保存

5mL 抑氨肽,5mg/mL Bestatin Solution -20℃保存

2 ug pUB6/V5 His A pUB6/V5 His A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

10次 Southern級(jí)細(xì)菌(G-)DNAout  

可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒微量法Glycophorin C/CD236  糖蛋白C抗體 規(guī)格: 0.1mlTNFC/lymphotoxin Beta  瘤壞死因子C/淋巴毒素β抗體 規(guī)格: 0.2ml

ECRG4/C2orf40  食道相關(guān)基因4蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlSPRR1a/Cornifin A  角質(zhì)蛋白α抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-RGS19(Ser24)  磷酸化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格: 0.1mlLIR-8/CD85c/LILRB5  白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體8抗體 規(guī)格: 0.2ml

XRCC4  X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2mlMAGEA12  黑色素瘤相關(guān)抗原12抗體 規(guī)格: 0.2ml

PCNA-Proliferation Marker  增細(xì)胞核抗原抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/Bio  標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml

ING1/p33  生抑制因子基因1抗體 規(guī)格: 0.1mlGFAP delta  膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAPδ抗體 規(guī)格: 0.2ml

GRK5  G蛋白偶聯(lián)受體激5抗體 規(guī)格: 0.2mlCXCL7/NAP-2/PPBP  小板趨化因子7蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

BRCAA1/RBBP1L1  相關(guān)抗原BRCAA1抗體 規(guī)格: 0.2mlCGP-39/YKL-40  軟骨糖蛋白39抗體 規(guī)格: 0.1ml

CAMTA1  鈣調(diào)蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-Paxillin(Tyr31)  磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格: 0.1ml

NHLRC3  非霍奇金重復(fù)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2mlIL-1 Beta/IL-1B  白介素1β抗體 IL-1β 規(guī)格: 0.1ml

SARS S-protein  抗表面S蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlMCM2  微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

MGMT  O6甲基DNA甲基轉(zhuǎn)移抗體 規(guī)格: 0.2mlLH  人促黃體生成素抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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