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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖酵解系列>> 磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒微量法

磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒微量法
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參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時(shí)間:2023-12-27 07:28:50瀏覽次數(shù):527評(píng)價(jià)

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貨號(hào) BK-01S6617
磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:麥康凱瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Maconkey Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基(PDP) 英文名稱:Pseudomonas Agar P 產(chǎn)品規(guī)格:250g 哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱:Columbia Blood Agar M

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6617

商品介紹:

測(cè)定意義:

磷酸丙糖異構(gòu)酶是重要的糖酵解酶,廣泛存在于動(dòng)植物及微生物體內(nèi),在機(jī)體內(nèi)參與葡萄糖代謝,在糖酵解,糖異生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代謝中都發(fā)揮著重要作用。

測(cè)定原理

磷酸丙糖異構(gòu)酶將磷酸二羥丙酮轉(zhuǎn)化為3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛與NAD3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH,340nm處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構(gòu)酶的活性的高低。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

氯、碘中和劑管  9ml*20

250mL 超敏化學(xué)發(fā)光(HRP)檢測(cè)試劑盒 Ultrasensitive ECL Kit 4℃保存

2 ug TetO-FUW-OSKM TetO-FUW-OSKM 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

500次 硅膠膜離心吸附柱再生液 Spin Column Recharger  常溫

2 ug pAc5.1B-EGFP pAc5.1B-EGFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(TSA) Tryptose Soya Agar 1kg

1瓶 Bel-7404細(xì)胞株 Bel-7404 低溫運(yùn)輸和保存

0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)顆粒 Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 300ml/袋*10

100次 即用型EMSA試劑盒 EMSA Kit -20℃保存

250mL NP40 Permeating Solution in TBS,10X(NP40滲透液,10X) NP40 Permeating Solution in TBS,10X 常溫保存

0.1mL×10 Rosetta (DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 Rosetta(DE3) Competent Cell -80℃保存

磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒微量法phospho-MEK1(Thr286)  磷酸化絲裂原活化蛋白激激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Frizzled 7/FZE3  卷曲蛋白FZD7抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD170/Siglec-5  唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-MEK5(Ser129)  磷酸化絲裂原活化蛋白激激5抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-human IgG/FITC  FITC標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.3ml

phospho-GIT1(Ser375)  磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1 規(guī)格: 0.1ml

Thrombomodulin/CD141  栓調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cytokeratin 5/CK5  細(xì)胞角蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml

ECE1  內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Monkey IgM/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格: 0.1mlLMBR1/DIF14  分化相關(guān)基因14抗體 規(guī)格: 0.2ml

Unrip/STRAP  絲/蘇激受體相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-Bcl 10(Ser218)  磷酸化Bcl-10抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-MEF2A (Ser408)  磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 規(guī)格: 0.1mlMARCH4  膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

 

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