目錄:上海帛科生物技術有限公司>>生化檢測試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> 血清高密度脂蛋白(HDLC)測試盒微量法
貨號 | BK-01S6665 |
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實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!
產品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
血清高密度脂蛋白(HDLC)測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6665 |
商品介紹:
測定意義: 高密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,運載周圍組織中的,再轉化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出,是一種抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,是冠心病的保護因子,俗稱“血管清道夫",對冠心病的臨床診斷是一個重要的參考指標。 測定原理 用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白,利用酯酶催化酯水解生成游離和游離脂肪酸,從而把酯轉化為FC;進一步利用氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機,恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
10mg 5′ - 二鳥 Guanosine 5′-Diphosphate (GDP),Disodium Salt -20℃保存
50T 芥末PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
250mL Carnoy固定液 Carnoy Solution 室溫避光保存
2 ug pBlueScriptR BBS4 pBlueScriptR BBS4 低溫運輸,-20℃保存
100g DNGuSCN(異硫酸胍)
2 ug pFUGW-H1 pFUGW-H1 低溫運輸,-20℃保存
碘液 2ml*20支
2 ug pTf16 pTf16 低溫運輸,-20℃保存
MUGal肉湯 MUGal Broth 100g
100U Poly(A)聚合,E.coli Poly(A) Polymerase -20℃保存
250mL Phosphate Buffered RIPA Phosphate Buffered RIPA 常溫保存
血清高密度脂蛋白(HDLC)測試盒微量法IL-2 白介素2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Connexin 43 間隙連接蛋白43抗體 規(guī)格: 0.1ml
UBE2C 泛素蛋白連接C抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCZ1 CCZ1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
RECQL5 RecQ解旋樣蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷酸化半胱蛋白9抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-YB1(Ser102) 磷酸化DNA結合蛋白B抗體 規(guī)格: 0.1mlAIM1L 黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
C19orf24 19號染色體開放閱讀框24抗體 規(guī)格: 0.2mlPGGT1B/FNTB 蛋白香葉烯基轉移1β(FTβ)抗體 規(guī)格: 0.2ml
PRL3/PRL-R 磷酸酯3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCD36L1/SRB1/HDL-R 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
ChRM3/Acetylcholine receptor(M3) 毒蕈堿型乙酰受體M3抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho C-Myc(Thr58/pSer62) 磷酸化致基因C-Myc抗體 規(guī)格: 0.1ml
ADAM12/MLTN 去整合素樣金屬蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-chicken IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1ml
BGP/Osteocalcin 骨保護蛋白/骨鈣素抗體 規(guī)格: 0.1mlARC/Arg3.1 ARC抗體 規(guī)格: 0.1ml