目錄:上海帛科生物技術有限公司>>基因檢測PCR試劑盒>>RNA/DNA提取試劑盒>> 探針標記專用PCR Mix
注意事項:產品僅用于科研1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱:探針標記專用PCR Mix
規(guī)格: 詳見說明
貨號:BK-P96831
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
2-雙環(huán)已基膦-2 ,6-二異炳氧基聯(lián)本 95% 2-DICYCLOHqXYLPHOSPHINO-2',6'-DI-I-PROPOXY-1,1'-BIPHqNYL 787618--8 英文名稱MousesP-selectinELISAKit小鼠可溶性sP-選擇素(sP-selectin)規(guī)格:96T/48T
胰島素(牛)INSULIN質量規(guī)格:BR,27U/mg,進分 人結蛋白(DES)抗體試劑盒 Human ai-desmin (DES) aibody ELISA kit 人肽-主要組織相容性復合體復合物(pMHC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
三丁基化锍(>96.0%(T))Tributylsulfonium Iodide質量規(guī)格:>96.0%(T) Ratai-myelinassociatedglycoproteinaibody,MAGAbELISAKit大鼠抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAGAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 豬P450膽側鏈裂解酶(P450scc)試劑盒 Pig Cytochrome P450 Side Chain Cleavage Enzyme,P450scc ELISA kit
螺[1,3,3-基吲哚并二氫吡喃][光致變色化合物](>98.0%(HPLC)(T))1,3,3-Trimethylindolinobenzopyrylospiran [Photochromic Compound]質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 組蛋白H3-K27(mono/di/i)甲基化檢測試劑盒10/20等 病毒H9亞型(AIV-H9)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T
1,3,3-基吲哚-奈諤嗪(>98.0%(HPLC)(T))1,3,3-Trimethylindolinonaphthospirooxazine [Photochromic Compound]質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) Mouseai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISA試劑盒小鼠抗心1脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T humanParathyroidhormone,PTHELISA試劑盒人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
BSudan Red B/Solvent Red 25質量規(guī)格:AR 小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 ,英文名: HIS ELISA Kit 組織樣品組織型纖維蛋白溶酶原激活劑(tPA)活性比色法定量檢測試劑盒20
7B/溶劑紅19/脂肪紅7BSudan Red 7B/Solvent Red 19質量規(guī)格:BS 小鼠凝血因子Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)ELISA檢測試劑盒MousecoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 96T/48T Humangrowth-associatedprotein43,GAP-43ELISAKit人生長相關蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 100)Vacuum pump oil質量規(guī)格:Viscosity Grade 100 人抗白蛋白抗體(AAA)試劑盒 Human ai-albumin aibody,AAA ELISA Kit 人胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
優(yōu)級真空泵油(Viscosity Grade 150)Vacuum pump oil質量規(guī)格:Viscosity Grade 150 RabbitoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 豬凝血因子X(F10)試劑盒 Pig coagulation factor X,F10 ELISA kit
探針標記專用PCR Mix大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106D-AlanineD-2-基5克BR,99%
CDH4 Others Human 人 R-Cadherin / CDH4 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-硼醋 2-Thiophqnqboronic ccid 6162-68-0
人扁桃體上皮細胞HTEpiCCobalt(II,III)oxide氧化鈷100克CP
HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆