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人白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒

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更新時間:2014-11-12 14:49:31瀏覽次數(shù):94次

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試驗原理:

人白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒
是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)。已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將已知濃度的標準品和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。

人白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒操作注意事項

試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀釋過后的標準品應丟棄,不可保存。

實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

人白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

 血清

操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g    離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

血漿

EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

細胞上清液

1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

組織勻漿

將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

保存

如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍

 

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