CAS:9068-38-6,AMV反轉(zhuǎn)錄酶,AMV逆轉(zhuǎn)錄酶,AMV Reverse transcriptase
英文名稱:AMV Reverse transcriptase;Revertase;RNA-directed DNA polymerase
其他名稱:AMV逆轉(zhuǎn)錄酶
CAS號:9068-38-6
級別:BR
來源:純化的鳥類成髓細胞性白血病病毒(Avian Myeloblastosis Virus)顆粒
濃度:10u/ul
活力定義:一個單位定義為:在37℃,10分鐘內(nèi)催化1nmol dTTP(脫氧核苷酸)摻入到酸不溶物中所需要的酶量。反應(yīng)條件為:50mM Tris-HCl (pH 8.3,25℃),8.75mM MgCl2,10mM DTT,40mM KCl,10mM DTT,0.1mg/ml BSA,1mM 放射性標記dTTP,0.25mM poly(A)400, 0.25mM oligo(dT)50
質(zhì)量控制測試:活性,SDS-PAGE/純度,DNase,RNase,核酸內(nèi)切酶,RT-PCR,cDNA*鏈合成
產(chǎn)品描述:AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶催化以DNA、RNA或RNA:DNA雜交體為模板的DNA聚合反應(yīng)(1)。它需要引物(DNA引物比RNA引物效率更高)以及Mg2+或Mn2+。該酶具有內(nèi)在的RNase H活性,非離子表面活性劑和氫硫根化合物可在體外增加該酶的活性
特點:
1. 高濃度產(chǎn)品: Cat.# M9004含有濃度為20-25u/ml的AMV RT 600單位。
2. 提供5×反應(yīng)緩沖液: 250mM Tris-HCl (pH 8.3,25℃);250mM KCl;50mM MgCl2;2.5mM 精胺;50mM DTT。
3. 溫度穩(wěn)定性:由于AMV RT在較高反應(yīng)溫度下較穩(wěn)定(37-58℃),特別適用于具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的模板的逆轉(zhuǎn)錄
儲存緩沖液: 200mM 磷酸鉀緩沖液(pH 7.2,4℃),0.2% Triton X-100,2mM DTT和50% (v/v)甘油
用途:cDNA*及第二鏈的合成。引物延伸及RNA測序(2)。RT-PCR,可以將10ml含有AMV RT及反應(yīng)緩沖液的產(chǎn)物直接加入含Taq DNA聚合酶的50ml PCR反應(yīng)體系中。如果使用GoTaq DNA Polymerase 或 PCR Master Mix,可以在每50ml PCR反應(yīng)體系中加入多至25ml RT反應(yīng)產(chǎn)物
性狀:懸浮液,由AMV分離而來的分子量約157000道爾頓的α β型全酶。本身具有核糖核酸酶H活性
用途:生化研究。在AMV反轉(zhuǎn)錄酶作用下,可以完成由RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA的過程,再由優(yōu)化的U-Taq DNA聚合酶擴增cDNA
保存:-20℃
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