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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光-PCR法>> 轉(zhuǎn)基因植物NPTII基因核酸檢測試劑盒價格
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時間:2019-04-17 12:58:51瀏覽次數(shù):801次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線大豆內(nèi)源基因Lectin核酸檢測試劑盒供應(yīng)商
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
?產(chǎn)品名稱:轉(zhuǎn)基因植物NPTII基因核酸檢測試劑盒價格
規(guī)格:48T/盒
類別:熒光-PCR法
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
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性能指標(biāo):點擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
?3-啶硼片吶酯 00mL TES Buffer,0.2M,pH8.0 常溫保存
2-氨基噻唑-5-羧乙酯 250mL Thrombin Buffer 常溫保存
4-氟-3-硝苯甲酯 250mL Tissue Embedding Reagent 常溫保存
二溴新戊二醇 000mL Transfer or Electro Blotting Buffer,0X 常溫保存
4-三氟甲氧苯甲 00mL Transformation Buffer- 常溫保存
4-氨基四氫吡喃鹽鹽 00mL Transformation Buffer-2 常溫保存
Boc-beta-丙氨 00mL Tricine Buffer,0.5M pH6.5 常溫保存
多肽試劑 TCTU 00mL Tricine Buffer,0.5M pH7.0 常溫保存
5-冠醚-5 00mL Tricine Buffer,0.5M pH7.4 常溫保存
3-氟苯乙 00mL Tricine Buffer,0.5M,pH8.0 常溫保存
5-氟-2-基甲 00mL Tricine Buffer,0.5M,pH8.5 常溫保存
L-丙氨胺鹽鹽 00mL Tricine Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存
4-三氟甲氧苯 500mL Tricine Buffered Saline,5X,pH7.0 常溫保存
6-氯-3-基啶 500mL Tricine Buffered Saline,5X,pH7.4 常溫保存
2-氯-4-基啶 2500mL Tricine Buffered Saline,5X,pH8.0 常溫保存
轉(zhuǎn)基因植物NPTII基因核酸檢測試劑盒價格Cq(Complement q) 人補體q CAS: 76350-28-2 規(guī)格: 50mg
GP- IV (platelet membrane glycoprotein IV ) 人血小板膜糖蛋白Ⅳ CAS: 2276-90-6 規(guī)格: 200mg
Thymosin Alpha 人α CAS: 8777-40-2 規(guī)格: 200mg
CCP(complement control protein) 人補體調(diào)節(jié)蛋白 CAS: 7680-93-9 規(guī)格: 50mg
PBP/CXCL7(platelet basic protein) 人血小板堿性蛋白 CAS: 0457-96-6 規(guī)格: 50mg
HLA-C(leukocyte antigen C) 人類白細(xì)胞抗原C CAS: 5907-64-0 規(guī)格: 00mg
HLA-E(leukocyte antigen E) 人類白細(xì)胞抗原E CAS: 07793-72-6 規(guī)格: 400mg
HLA-A(leukocyte antigen A) 人類白細(xì)胞抗原A CAS: 2287-58-5 規(guī)格: 00mg
SAP(Serum amyloid P) 人血清淀粉樣蛋白P CAS: 22-56-3 規(guī)格: 200mg
MBLR(Mannma binding lectin receptor) 人甘露糖凝集素受體 CAS: 66985-7-9 規(guī)格: 00mg
PL/Fbn(plasmin/fibrinolysin) 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶 CAS: 58005-8-8 規(guī)格: 0mg
BCR(B cell receptor) 人B細(xì)胞受體 CAS: 58073-59-9 規(guī)格: 0mg
mIgM(membrane IgM) 人表面膜免疫球蛋白M CAS: 552-63-6 規(guī)格: 5mg
mIgD(membrane IgD) 人表面膜免疫球蛋白D CAS: 36572-09-3 規(guī)格: 00mg
KIR(killer cell immnoglobulin-like receptor) 人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體 CAS: 9685-09-7 規(guī)格: 0mg
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